论文部分内容阅读
目的:观察臭氧抗福尔马林炎性痛中p38/MCP-1信号通路的作用。方法:成年雄性sprague-dawley(SD)大鼠84只,体重250-300 g,测量其机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)的基础值。随机分为空白对照组(C组)、炎性痛组(F组)、F+氧气组(FO2组)、F+臭氧组(FO3组)、F+p38抑制剂组(FSB组)、F+p38抑制剂溶剂对照组(FD组)、F+MCP-1中和抗体组(FM组)。炎性痛组:左足底掌部皮下注射5%福尔马林100μl。福尔马林注射后1 h,FO2组、FO3组患侧足底分别注射纯氧、臭氧(30μg/ml)50μl,FSB组、FD组、FM组鞘内分别注射p38抑制剂SB203580(10μl/rat)、D MSO(10μl/rat)、MCP-1中和抗体(10μl/rat、1μg/μl)。分别于福尔马林注射后1 h、2 h、4 h、24 h时测定大鼠患侧足机械缩足痛阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL),同时间点取脊髓腰膨大及L4-5背根神经节(DRG),同时用免疫组化(immunohistochemical,IHC)和Western Blot测定脊髓背角和DRG中MCP-1和P-p38含量。结果:1、组织病理学观察:与C组相比,福尔马林注射后1 h,F组、FO2组、FO3组、FSB组、FD组、FM组真皮组织排列紊乱,纤维组织疏松、断裂、炎性细胞浸润;给药后4 h、24 h,与F组相比,FO3组炎性细胞浸润明显降低,有新生成纤维细胞,FO2组、FSB组、FD组、FM组真皮组织排列紊乱,纤维组织疏松,炎性细胞浸润基本一致。2、大鼠痛阈的变化:福尔马林注射前,各组大鼠患侧足底MWT、TWL基础值无差别。与C组相比,建模后F组、FO2组、FO3组、FSB组、FD组、FM组MWT降低,TWL缩短(P<0.01);与F组相比,给药后4h、24h,FO3组、FSB组MWT显著升高,TWL明显延长(P<0.01),FO2组、FD组MWT、TWL改变不明显(P>0.05),FM组MWT明显升高,TWL明显延长(P<0.01)。3、脊髓背角及DRG p38和MCP-1蛋白测定3.1、P-p38:与C组相比,其他各组在福尔马林注射后大鼠脊髓背角和DRG中P-p38蛋白表达有显著升高(P<0.01)。与F组相比,给药后4 h、24 h FO3组、FSB组脊髓背角及DRG p-P38蛋白表达明显减少(P<0.01)。FO2组、FD组与F组P-p38蛋白表达基本一致,组间无统计学差异(P>0.05)。IHC与Western Blot结果一致。3.2、MCP-1:与C组相比,其他各组在福尔马林注射后,大鼠脊髓背角和DRG中MCP-1蛋白表达比C组有明显升高(P<0.05)。与F组相比,给药后的4 h、24 h FO3组、FSB组脊髓背角及DRG中MCP-1蛋白表达有明显减少(P<0.01),FM组有明显降低(P<0.05)。FO2组、FD组与F组相比,组间无统计学差异。IHC与Western Blot结果一致。结论:(1)足底局部注射臭氧能有效减轻福尔马林诱发的热痛敏和机械痛敏。(2)福尔马林诱导的炎性痛大鼠脊髓背角和背根神经节P-p38、MCP-1表达增加,提示P-p38、MCP-1表达上调可能参与炎性痛的发生发展。(3)臭氧可能是通过抑制p38/MCP-1信号通路从而减轻炎性痛的作用。