鼠伤寒沙门菌ybiH基因突变株的构建及其生物学功能分析

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【目的】鼠伤寒沙门菌是一种可感染多种宿主的人兽共患病原微生物,具有重要的公共卫生研究意义。实验室前期蛋白质组学研究发现,在麝香草酚选择压力下,沙门菌中的一种功能未知因子YbiH蛋白表达水平明显降低,初步验证发现其与细菌致病性关系密切,但YbiH在沙门菌致病过程中发挥何种功能还不清楚,有必要了解清楚其在沙门菌生长过程中的生物学功能,从而为沙门菌污染的控制和沙门菌病的有效防治提供一定的理论依据。【方法】采用λ-Red同源重组系统构建鼠伤寒沙门菌ybiH基因缺失株STΔybiH,同时构建该基因的回补株STΔybiH/pybiH及过表达株,并对ybiH突变株的生长特性、运动性、生化特性、粘附力、侵袭力、毒力变化及致病性等生物学特性进行研究,以确证YbiH在沙门菌生长过程中的生物学作用。【结果】研究表明,与鼠伤寒沙门菌标准株和回补株相比,缺失株STΔybiH生长速率略快,而其运动性、生化特性、耐药性等均无明显差别。细胞试验结果显示,ybiH基因的缺失明显提高了鼠伤寒沙门菌对IEC-6细胞的黏附力和侵袭力,q RT-PCR检测时侵袭基因的表达量也明显提高。在小鼠攻毒试验中,缺失株对小鼠的毒力更强,死亡更快,小鼠脾脏的载菌量明显大于肝脏。【结论】YbiH在鼠伤寒沙门菌的黏附侵袭力变化过程中发挥重要作用,在其缺失后,会导致沙门菌的毒力增加,对小鼠的致病性增强,由此说明YbiH直接参与沙门菌毒力变化和致病性的调控,本文为进一步阐明YbiH调控沙门菌致病性的分子机制提供了一定的理论基础。
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