雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook.f.)属卫矛科雷公藤属植物,是一种珍贵的药用植物,主要分布于我国的福建、浙江、安徽、江西、台湾等省份。植物内生细菌广泛存在于各种健康植物的组织和器官中,与宿主植物和谐共存、相互影响,内生细菌与植物的共生体也被认为是自然界中的一种普遍现象。在植物微生态系统中,内生细菌长期生活在植物体内,对宿主植物的生理生化活动产生重要的影响,一些植物内生细菌已被证明扮演着有益生物学角色,它们可以通过溶磷、固氮、产铁载体、分泌生长素等作用促进宿主植物的生长,并在植物抗逆境、抗动物摄食、抗病原菌等方面发挥着重要作用。近年来,国内外学者已陆续从不同药用植物体内筛选出对宿主植物次生代谢过程具有重要影响的内生菌,它们不但自身能够产生特殊的活性物质,还能参与植物活性成分的合成,或促进植物体内次生代谢产物进行转化。本文通过对雷公藤内生细菌进行分离,筛选鉴定具有益生作用的内生细菌,并通过菌苗共生技术及悬浮诱导子添加技术,对目标细菌的实际促生效果及对甲素合成的影响进行评价。主要结果如下:1、从健康雷公藤植株体内分离得到23株内生细菌,对其有益生物学特征及对小麦萌发能力影响进行评价,得出4株益生效果显著的内生细菌。这4株内生细菌均能产生植物生长素,LG3、LJ10、LY3能分泌铁载体,其中LG3、LJ10具有溶磷特性,LG3、LY4具有固氮功能并同时具有1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶(ACC脱氨酶)活性。2、经细菌16S rDNA序列鉴定及同源性分析发现,LG3和LY4分别于阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)和肠杆菌属(Enterobacter sp.)的相似度达到了 99%,LJ10 与泛菌属(Pantoea eucrina)的相似度达到了99%,而LY3与菠萝泛菌(Pantoea ananatis)的相似度达到了99%。3、将4株目标菌株回接到雷公藤组培苗中发现,4株目标菌株不但能够促进雷公藤植株的生长,还能显著提高不同器官内雷公藤甲素的含量,提高植物体内叶绿素含量及过氧化物酶和超氧化物歧化酶的活性,降低超氧阴离子自由基的产生速率和植物体内丙二醛的含量。4、将4株目标菌株接种到水培雷公藤中,结果表明,4株目标菌株均能促进雷公藤植株的生长,促生效果最为明显的是LY4菌株和LG3菌株,同时,该4株目标菌株能不同程度地促进雷公藤对营养元素C、N、P、K的吸收及雷公藤甲素的合成,而多酚氧化酶(PPO)酶活各个处理的活性变化不大,苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶活则与雷公藤的生长状况相反,即雷公藤的长势越好,PAL的酶活性越低。5、将内生细菌菌液(P)、内生细菌粗提物(J)及未经处理的活菌(H)3种诱导子添加到雷公藤悬浮细胞中,结果表明3种诱导子均能提高悬浮细胞培养液中可溶性糖的消耗速率及细胞内可溶性蛋白的含量。P组处理对雷公藤悬浮细胞的生长具有明显的促进作用,其中,P-LJ10与P-LG3处理促生效果最好。