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第一部分脂蛋白(a)诱导的细胞骨架构建及其促血管平滑肌细胞迁移目的：研究脂蛋白(a)所诱导的人血管平滑肌细胞的迁移及细胞骨架构建变化。方法：本研究用不同浓度的脂蛋白(a)[Lp(a)]诱导原代培养的人血管平滑肌细胞(VSMC)，通过迁移试验观察VSMC迁移数量的变化。Lp(a)诱导VSMC，在不同时间点用免疫荧光标记与细胞运动有关的肌动蛋白细胞骨架结构，激光共聚焦显微镜观察人VSMC细胞骨架构建变化情况。结果：Lp(a)的终浓度从40μg／ml至640μg／ml，其诱导的迁移细胞数随Lp(a)的终浓度的升高而增加(P＜0.05)。Lp(a)诱导VSMC10分钟后，激光共聚焦显微镜观察，可见细胞内出现张力纤维和粘着斑，并可见丝状伪足；20分钟后张力纤维和粘着斑明显增多；30分钟后细胞内的张力纤维和粘着斑较20分钟时无明显变化。结论：Lp(a)诱导后VSMC细胞骨架构建出现规律性的变化，从而导致VSMC的迁移。第二部分RhoA及Rac1介导的脂蛋白(a)促血管平滑肌细胞迁移作用目的：研究RhoA及Rac1在Lp(a)诱导的VSMC细胞骨架构建及迁移中的作用。方法：用脂质体将Rac1siRNA转移至VSMC内(RNAi)，阻断Rac1的表达，再用Lp(a)诱导阻断后的细胞，RT-PCR和Western blot检测RNA干扰效果，激光共聚焦显微镜观察细胞骨架构建变化，迁移试验观察VSMC迁移数量的变化。用脂质体将C3转移酶转移入VSMC阻断RhoA通路，再用Lp(a)诱导阻断后的细胞，激光共聚焦显微镜观察细胞骨架构建情况，迁移试验观察VSMC迁移数量的变化。结果：RT-PCR和Western blot检测均显示Rac1siRNA干扰效果明显，较未干扰组和对照siRNA组有显著差异(P＜0.01)。Rac1siRNA干扰人VSMC，Lp(a)诱导20分钟后，激光共聚焦显微镜观察，细胞内未见明显的张力纤维、粘着斑及丝状伪足。未干扰组VSMC迁移细胞数为77.47±5.53个，对照siRNA组为77.20±7.46个，Rac1siRNA组为40.13±4.84个，Rac1siRNA组迁移细胞数较未干扰和对照siRNA组均明显减少(P＜0.01)。C3转移酶阻断RhoA通路，Lp(a)诱导20分钟后，细胞内未见明显的张力纤维、粘着斑及丝状伪足。C3转移酶组VSMC迁移细胞数为42.47±6.06个，对照组为76.47±6.28个，C3转移酶组迁移细胞数较对照组明显减少(P＜0.01)。结论：Lp(a)诱导的VSMC细胞骨架构建及细胞迁移依赖于Rac1及RhoA的生物学活性。第三部分ERK及p38在脂蛋白(a)促血管平滑肌细胞迁移中的作用目的：研究ERK及p38在Lp(a)诱导的VSMC细胞骨架构建及迁移中的作用。方法：分别用不同浓度的ERK激酶抑制剂PD98059及p38激酶抑制剂SB202190抑制人VSMC内ERK及p38的活化，再用Lp(a)诱导处理后的细胞，Western blot检测P-ERK及P-p38的表达，激光共聚焦显微镜观察细胞骨架构建变化，迁移试验观察VSMC迁移数量的变化。结果：Western blot检测显示PD98059的终浓度在10μmol／L时P-ERK表达无明显变化(P＞0.05)，从20μmol／L至40μmol／L，随其终浓度的逐渐升高，P-ERK的表达逐渐降低(P＜0.01)，达到40μmol／L后，其抑制作用达到高峰；SB202190的终浓度从5μmol／L至20μmol／L，随其终浓度的逐渐升高，P-p38的表达逐渐降低(P＜0.01)，达到20μmol／L后，其抑制作用达到高峰。PD98059及SB202190分别预处理人VSMC，Lp(a)诱导20分钟后，细胞内未见明显的张力纤维、粘着斑及丝状伪足。对照组VSMC迁移细胞数为78.87±7.43个，PD98059处理组为49.20±6.47个，SB202190处理组为51.73±8.25个，PD98059处理组及SB202190处理组迁移细胞数均较正常对照组明显减少(P＜0.01)。结论：Lp(a)诱导的VSMC细胞骨架构建及细胞迁移依赖于ERK及p38的活化。