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皮层肌动蛋白结合蛋白cortactin是一种微丝骨架结合蛋白,作为Src激酶直接磷酸化的底物受到酪氨酸磷酸化信号通路的调控,从而成为信号通路与细胞骨架重要的联系分子。Cortactin可以通过影响细胞运动前沿微丝骨架重组从而提高细胞迁移的能力。有研究发现cortactin可以在肿瘤细胞的浸润和转移过程中发挥作用。目前对于cortactin的研究大多围绕其参与微丝骨架重组过程的调控以及受到激酶磷酸化信号调控等方面。同时,在许多病人癌症组织样本中cortactin基因均有异常的高表达,表明cortactin可能和肿瘤的形成过程有关,但其中具体的机制还不清楚。
这里我们研究发现cortactin可以参与细胞周期中的两个关键事件调控。
首先,cortactin的酪氨酸磷酸化修饰程度在细胞进入有丝分裂期时达到最高,而此时酪氨酸磷酸化cortactin主要定位在中心体上。酪氨酸磷酸化cortactin定位中心体开始于中心体彼此分离的G2期,并且分开的中心体上均有磷酸化cortactin的定位。中心体上定位的cortactin中三个Src激酶的磷酸化位点均被磷酸化,表达缺失微丝结合区域而只保留磷酸化位点所在的C端调节区域的cortactin片段,会抑制G2期中心体的分离过程。此外,使用特异性的药物解聚微丝骨架同样可以抑制中心体的分离过程,延缓细胞进入有丝分裂期。上述研究表明酪氨酸磷酸化cortactin可以连接中心体和微丝骨架,帮助微丝骨架拉动中心体的分离。
其次,我们通过RNAi技术沉默细胞内cortactin的表达,会使得双核细胞的比例升高。研究发现cortactin表达抑制的细胞中微丝收缩环和微管中心纺锤体结构正常,但胞质断裂过程受到抑制。在胞质断裂时期cortactin定位于高尔基体和断裂处子细胞间细胞膜的位置。抑制cortactin的表达会抑制断裂处子细胞间细胞膜的形成,而这种膜组分主要来自内膜组分中的循环内吞体。此外,高尔基体和微丝骨架对于cortactin参与断裂处子细胞膜的形成是必需的。上述研究表明微丝骨架通过cortactin调控高尔基体向子细胞断裂处运输囊泡形成新细胞膜的过程。
除此之外,我们还发现在间期细胞中cortactin可以参与细胞和外基质粘附调控过程。酪氨酸磷酸化修饰的cortactin可以定位于黏着斑的位置,并且受到Src激酶的调控。Cortactin蛋白位于整合素信号通路中,酪氨酸磷酸化修饰受到细胞与外基质作用的调控。同时,cortactin可以和黏着斑激酶FAK相互作用,抑制cortactin的表达可以抑制FAK自激活过程。上述研究揭示了cortactin参与细胞迁移调控的新机制,也反映出cortactin酪氨酸磷酸化水平与肿瘤细胞浸润转移过程相关的内在机制。
我们的研究结果表明cortactin可以在细胞周期的调控中发挥重要的作用,为cortactin蛋白参与肿瘤发生过程提供了新的参考依据;同时由于cortactin是微丝结合蛋白,我们在研究过程中也对于微丝骨架参与细胞周期调控进行了相应的研究,从另一个侧面反映出微丝骨架同样对于细胞周期调控具有重要的意义;除此之外,我们还揭示了cortactin在细胞迁移过程中新的生物学功能。