c-Jun氨基末端蛋白激酶(c—Jun NH2—terminalprotein kinase，JNK)家族是促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)超家族成员之一。以JNK为中心的信号通路可被细胞因子、生长因子、应激等多种因素激活。大量实验证实，JNK信号通路在细胞分化、细胞凋亡、应激反应以及多种人类疾病的发生与发展中起着至关重要的作用。 核孤儿受体TR3是一种立早基因(immediate early gene)的产物，与固醇类激素受体结构相似，是核受体超家族的重要成员之一。TR3可被多种生长因子或凋亡诱导剂诱导表达，具有复杂的生物学功能，涉及细胞增殖、分化发育和凋亡的调控过程。 我们实验室前期实验已经证明，JNK激活剂Anisomycin能诱导TR3磷酸化，并在构建的一系列TR3缺失突变体(TR3△C574、TR3△N98、TR3△N50、TR3△N74、TR3△N84、TR3△N92)中推测JNK磷酸化TR3的位点可能在93—98氨基酸残基之间(93—ATS*PAS—98)，因为此序列中含有JNK磷酸化的典型模式序列S*P。本文中，我们进一步证实，Anisomycin通过激活JNK1(而非p38和ERK)诱导TR3磷酸化，该过程可以被JNK上游激酶MAPKK4和MAPKK7调控。通过构建新的TR3点突变(即将TR3第95位丝氨酸突变为丙氨酸)，我们证实了JNK磷酸化TR3的精确位点位于TR3的第95位丝氨酸。进一步研究表明，JNK磷酸化TR3与TR3泛素化密切相关。磷酸化为泛素的结合提供了锚定位点，促进TR3的泛素化降解。另外，JNK磷酸化抑制TR3与DNA应答元件的结合，抑制TR3的转录激活能力。在HEK293T细胞中，TR3能够促进细胞的DNA合成，而JNK磷酸化则破坏TR3有丝分裂原的活性。 总之，我们的研究不仅第一次确定了JNK磷酸化TR3的精确位点，而且将磷酸化和泛素化的研究紧密结合起来，发现JNK通过磷酸化和泛素化调控TR3的部分信号途径。这些研究可能为阐明JNK和TR3在某些肿瘤发生发展中的作用机理，为筛选特异性药物治疗TR3依赖性肿瘤提供了理论依据。