【摘 要】
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肉鸡腹水综合征（Asites Syndrom,AS）是禽类的一种常见营养代谢病,病因繁多,发病率高。目前防治AS的药物有腹水净、维生素C等,中草药具有低残留、低毒副作用、安全性能高的优点,可以有效防治AS。研究表明,纤维化参与了 AS的发生发展,Akt/mTOR信号通路及其相关因子参与了自噬和上皮-间质转分化（Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT）的发生,而
【基金项目】
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山西省自然科学基金（201901D111235）； 山西省重点研发计划重点项目（201703D211001-05-02）；
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肉鸡腹水综合征（Asites Syndrom,AS）是禽类的一种常见营养代谢病,病因繁多,发病率高。目前防治AS的药物有腹水净、维生素C等,中草药具有低残留、低毒副作用、安全性能高的优点,可以有效防治AS。研究表明,纤维化参与了 AS的发生发展,Akt/mTOR信号通路及其相关因子参与了自噬和上皮-间质转分化（Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT）的发生,而 自噬和 EMT 与纤维化的发生发展密切相关。本试验旨在研究复方中药对腹水肉鸡Akt/mTOR信号通路及其相关因子的作用及其机制。方法:以低温（9～11℃）、高能（饲料添加3%猪油与4%鱼粉）、高钠（饮水添加0.12%NaCl）多因素法复制AS模型。把120羽7日龄罗斯肉鸡随机分为空白组（Blank group,B 组）、模型组（Modelgroup,M 组）、复方中药高剂量组（Highdosegroup,H组;饮水中添加复方中药2 mL/kg·bw·d）、复方中药低剂量组（Low dose group,L组;饮水中添加复方中药1 mL/kg·bw·d）、阳性中药组（Positivegroup,P组;饮水中添加芪苓绞股蓝散1 mL/kg·bw·d）和L-精氨酸组（L-argininegroup,L-Arg组;日粮中添加1%L-Arg）。在15、25、35日龄分别从各组盲选5羽肉鸡,称重、剖检、观察各组织病理变化,取心脏并处理,计算肉鸡腹水心脏指数（ascitesheartindex,AHI）;Masson染色法制备切片并观察35日龄肉鸡肝脏的胶原纤维变化;ELISA法检测35日龄肉鸡肝、心、空肠、肺、肾组织p-Akt和mTOR的蛋白表达量;荧光定量PCR法检测35日龄肉鸡肝、心、空肠、肺、肾组织Beclin1、N-cadherin和S6K1基因相对表达量。结果:1.试验发现,与B组相比,M组肉鸡精神沉郁,羽毛杂乱无章,腹部膨大,触诊有波动感;剖检可见心包积液、右心室肥大、心壁增厚,腹腔有黄色液体,肝、肺、肾等组织充血肿大,肠壁有出血点。与M组相比,H组、L组、P组和L-Arg组AS肉鸡的临床症状和剖检变化都有缓解。2.各日龄M组肉鸡体重显著低于B组,（P＜0.01,P＜0.05）,AHI显著高于B组（P＜0.01）;H组、L组、P组和L-Arg组肉鸡体重显著高于M组（P＜0.01,P＜0.05）,AHI极显著低于M组（P＜0.01）。3.肝组织Masson染色切片观察结果表明,与B组相比,M组肉鸡肝组织细胞结构不清、排列紊乱,大部分细胞明显萎缩,胶原纤维增多;与M组相比,H组、L组、P组和L-Arg组均有不同程度地改善。4.不同组织蛋白检测结果表明,35日龄M组肉鸡肝、心、空肠、肺、肾组织mTOR和p-Akt蛋白表达量显著高于B组（P＜0.01,P＜0.05）;H组、L组、P组和L-Arg组肉鸡肝、心、空肠、肺、肾组织mTOR和p-Akt蛋白表达量显著低于M组（P＜0.01,P＜0.05）。5.不同组织基因检测结果表明,35日龄M组肉鸡肝、心、空肠、肺、肾组织Beclin1基因相对表达量显著低于B组（P＜0.01,P＜0.05）,N-cadherin和S6K1基因相对表达量显著高于B组（P＜0.01,P＜0.05）;H组、L组、P组和L-Arg组鸡肝、心、空肠、肺、肾组织Beclin1基因相对表达量显著高于M组（P＜0.01,P＜0.05）,N-cadherin和S6K1基因相对表达量显著低于M组（P＜0.01,P＜0.05）。结论:1.AS肉鸡自噬水平降低,发生了 EMT,诱导肝、心、空肠、肺、肾等不同组织纤维化的发生发展,表明自噬、EMT和纤维化与AS的发生密切相关。2.由黄芪、当归、丹参、茯苓、甘草等组成的自拟复方中药具有补气补血、活血行气、利水渗湿功能,由黄芪、茯苓、绞股蓝、紫草、泽泻组成的芪苓绞股蓝散具有益气活血、渗湿健脾、利水消肿的功效,复方中药和芪苓绞股蓝散能提高机体自噬水平,抑制EMT和组织纤维化的病理发展,有效防治AS,它们的防治作用与复方的配伍以及对Akt/mTOR信号通路及其相关因子的调节密切相关。3.L-Arg可以上调机体自噬水平,抑制EMT,缓解各组织纤维化的进程,有效防治AS,其机制与Akt/mTOR信号通路及其相关因子有关。4.与芪苓绞股蓝散和L-Arg相比,自拟复方中药对Akt/mTOR信号通路及其相关因子的调控以及AS的防治效果更好。
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