基于内质网应激损伤研究抵当汤对脑出血大鼠p-eIF2α、CHOP及GRP78蛋白表达的影响

来源 :长春中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tc_b074220
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目的:本实验采用动物实验,研究抵当汤对脑出血后内质网应激损伤PERK通路相关蛋白及基因表达的影响,从而探讨抵当汤对脑出血后神经损伤的保护作用,为临床上抵当汤治疗脑出血提供科学理论依据。方法:以健康的Wistar大鼠60只作为研究对象,采用自体血注射尾状核的方法制作大鼠脑出血模型,将大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、以及抵当汤低、中、高剂量组,每组12只。用Longa五级评分法对几组大鼠进行神经功能评分;采用Billot公式计算法测定出脑出血大鼠的脑含水量;采用免疫蛋白印记(western blot)方法,比较各组eIF2α、p-eIF2α、GRP78及CHOP蛋白在脑出血半暗带区的表达;采用RT-PCR方法,比较GRP78及CHOP的mRNA的表达。结果:1、与模型组比较,Longa五级评分法显示抵当汤低、中、高剂量组的神经功能评分显著降低,有统计学意义(<0.05)。2、与模型组比较,Billot公式计算法显示抵当汤低、中、高剂量组的脑含水量显著降低,有统计学意义(<0.05)。3、与模型组比较,western blot法检测显示抵当汤低、中、高剂量组p-eIF2α、GRP78及CHOP蛋白表达降低,有统计学意义(<0.05)。4、与模型组比较,RT-PCR法检测显示抵当汤低、中、高剂量组GRP78及CHOP的mRNA表达降低,有统计学意义(<0.05)。结论:通过实验证明了抵当汤能明显改善脑出血大鼠的神经功能缺损、促进大鼠脑出血后的血肿吸收、降低脑含水量;从蛋白水平证明其作用机制可能下调p-eIF2α、GRP78及CHOP蛋白的表达有关;从基因水平证明其机制可能通过下调GRP78及CHOPmRNA的表达。综上所述,抵当汤可以抑制与细胞凋亡相关的信号通路的活化,从而抑制过度的内质网应激损伤,对脑出血半暗带区的神经细胞有保护作用,从而减轻神经元凋亡。
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