番鸭小鹅瘟病免疫荧光诊断方法的建立及应用

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小鹅瘟病是由鹅细小病毒(Goose Parvovirus,GPV)感染1月龄以内雏鹅和雏番鸭,引起拉稀和小肠形成栓塞为特征的一种传播快、死亡率高的高度接触性传染病。该病常与番鸭细小病毒病混合感染,根据流行病学、临床症状和病理变化难以确诊,因此,研制简便快速的诊断方法对本病确诊具有重要意义。采用透析法将抗GPV单抗标记上异硫氰酸荧光素(FITC),研制出GPV直接荧光抗体试剂,建立了检测GPV抗原的直接免疫荧光检测方法(DFA)。该方法特异性强(仅与GPV反应,对MPV、MDRV、PMV等均无交叉反应)、敏感性高(最佳工作浓度为1:150,1:450倍稀释仍对抗原敏感)、快速检测(60分钟内结果)和重复性好等特点。该方法与病毒分离法和间接荧光法(IFA)比较,符合率分别为100%和95.%,三者总符合率为95.%。应用DFA检测GPV在人工感染番鸭的第3天,第5天,第7天和第10天各器官中病毒的动态分布结果表明,感染早期在心、肝、脾、肾、胰腺、盲肠扁桃体均为强阳性;感染后期在心、肝、脾呈弱阳性,在胰腺和盲肠扁桃体呈强阳性。进一步证实了DFA方法特异性好,可用于番鸭小鹅瘟病的临床快速诊断和GPV抗原在组织中的定位。
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