目的:探讨通过雷帕霉素诱导肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)自噬以及对TAMs自噬的调控来调节膀胱癌细胞上皮间质转化(EMT)的机制。方法:用免疫组化染色、免疫荧光检测膀胱癌组织和癌旁组织中的自噬相关蛋白LC3、EMT相关调节因子的表达水平,并用电镜观察其中自噬小体数量。人单核细胞(THP-1)细胞用PMA和IL-4+IL-10相继作用72h,诱导细胞极化为TAMs(M2),观察细胞形态学变化,并用流式细胞术及免疫荧光检测M1和M2表面CD86,CD206,F4/80等标志性分子表达情况,鉴定TAMs极化效率。用自噬调节剂雷帕霉素、3-MA干预TAMs 24h,去除自噬调节药物的干预48h后,通过Western Blot以及免疫荧光检测LC3表达,以及电镜观察自噬小体数量,确定药物干预后的TAMs自噬水平。将雷帕霉素干预后的TAMs与人膀胱癌细胞(T24)进行非接触共培养,Western Blot检测膀胱癌细胞EMT相关因子的表达,并通过transwell、划痕方法检测膀胱癌细胞的侵袭和迁移能力。结果:免疫组化染色检测显示,膀胱癌组织中的自噬相关蛋白LC3和EMT相关调节因子的表达水平以及自噬小体数量高于癌旁组织;免疫荧光检测显示,LC3除表达于膀胱癌细胞外,在膀胱癌组织TAMs中也存在表达,并且MIBC组织中TAMs的LC3表达水平高于NMIBC组织及癌旁组织。人单核细胞(THP-1)经PMA和IL-4+IL-10先后作用共72h后,细胞状态由半悬浮变为贴壁,经流式细胞术、免疫荧光检测发现TAMs表面CD206的表达较M1组明显增强,差异具有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光、Western blot检测及电镜观察显示,TAMs去除雷帕霉素刺激48h后,仍维持LC3高表达水平且LC3的表达较其他组明显增强,且电镜观察其自噬小体数量增加。TAMs和膀胱癌细胞(T24)非接触共培养48h,划痕及Transwell实验表明,经雷帕霉素作用后的TAMs,能明显增强膀胱癌细胞的迁移、侵袭能力,差异具有统计学意义(P<0.05),Western Blot检测显示膀胱癌细胞EMT相关基因和蛋白的表达上调。结论:TAMs自噬和膀胱癌EMT的发生相关;雷帕霉素通过诱导TAMs自噬可调节膀胱癌EMT的发生。