丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)能导致急性和慢性肝炎，肝硬化以及肝癌，是重要的人类病原体之一。全球约有1.7亿HCV感染者，但目前缺乏疫苗，治疗手段疗效有限。　　HCV假病毒模型(HCVpp)、复制子模型和细胞感染模型(HCVcc)是目前用来研究HCV的三种体外模型。包膜糖蛋白E1和E2是HCV主要的结构蛋白，参与病毒的入侵、组装和释放。此外，包膜糖蛋白还包含重要的中和表位，参与病毒的免疫逃逸。目前对HCV包膜蛋白的研究主要采用HCV假病毒感染模型和细胞感染模型，然而它们各自存在一定的局限。HCVpp产生自非肝细胞，而且基因组来自慢病毒或者逆转录病毒，无法模拟真病毒感染的过程，而且往往不能包装出病人来源的假病毒颗粒。HCVcc的分子病毒学操作并不方便，而且无法避免定点突变的顺式效应。为了弥补现有系统的不足，我们构建了基于HCV基因型2a(JFH1株)包膜蛋白的反式互补细胞模型。我们发现表达JFH1包膜蛋白的质粒或者稳定细胞系能够反式拯救缺失包膜蛋白编码序列的JFH1基因组，产生具有单轮感染力的病毒颗粒(命名为HCV△E)。HCV△E能真实模拟HCVcc病毒的感染，但由于它的基因组缺陷，导致其无法产生子代病毒。这种特点不但有利于包膜蛋白功能的基础研究，而且由于它表达的结构和非结构蛋白能刺激宿主产生相应的B细胞和T细胞免疫反应，也为HCV疫苗的开发提供新的思路。我们还利用HCV△E系统对包膜糖蛋白E2中的3个高可变区HVR1，HVR2和IgVR作了功能性分析。结果显示HVR2和IgVR为病毒组装所必需，HVR1的缺失对病毒的组装基本不影响，但缺失HVR1的病毒更容易被广谱中和性抗体所抑制。　　接下来我们建立了HCV基因型1b代表株Con1以及我国1b型临床样品分离株的反式互补模型。我们发现不同基因型的HCV△E对E2中和性抗体的敏感性不一样。此外，我们发现带HA标签的包膜蛋白也能够反式互补缺失包膜蛋白的JFH1基因组，产生带标签的HCV△E。这种病毒可以被偶联HA抗体的琼脂糖亲和纯化获得。这种纯化HCV的新方法不但有利于HCV包膜蛋白的生物学功能和病毒颗粒结构的研究，而且为HCV疫苗的研发奠定了基础。　　最后，我们还首次发现水疱性口炎病毒(VSV)的包膜蛋白也能够反式拯救缺失包膜蛋白编码序列的JFH1基因组，产生具有单轮感染力的嵌合病毒颗粒(命名为HCVvsv)。我们的结果表明HCVvsv侵入细胞是通过VSV的包膜蛋白而不再受到HCVcc的宿主域限制。由于VSV的包膜蛋白的宿主域非常广，HCVvsv能够作为工具转导HCV复制子RNA到HCV的非允许细胞。　　综上所述，本文建立了基于HCV包膜糖蛋白反式互补的新型细胞培养模型，可以产生具有单轮感染力的病毒颗粒。该细胞模型不但有利于更方便的研究HCV包膜糖蛋白的生物学功能，评估中和抗体的效果，也为HCV疫苗的开发提供了新思路。