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花生是我国重要的油料作物和经济作物，山东省的花生种植面积较大。但由于耕地面积有限与市场需求矛盾，导致花生连作现象普遍，连作障碍严重。本文以连作花生根际土壤为研究对象，运用平板培养方法和现代分子生物学技术，对花生根际微生物种群随着连作年限增加的动态变化进行了研究。同时对其中的优势微生物进行了分离鉴定。
采用土壤稀释分离法对连作花生根际中的微生物进行分离，细菌采用牛肉膏蛋白胨培养基，真菌采用马丁氏琼脂培养基，放线菌采用高氏一号培养基进行分离，统计土壤样品中每种微生物的数量。结果发现:花生连作后根际中细菌的数量减少，真菌的数量增多。与未种花生根际相比，种植花生1年到4年，随着连作年限的增加，根际中细菌的数量减少，真菌的数量增多。种植花生1年，根际中细菌数量比未种花生土壤减少61％，真菌数量比未种花生土壤增加30.66％;种植花生2年，细菌数量减少71％，真菌数量增加54％;种植花生4年根际中细菌数量减少71.33％，真菌数量增加66.67％。但是连作7年后根际土壤中细菌的数量又有所增加，真菌数量有所减少。连作后根际中放线菌的数量变化不明显，但是与未种花生的根际相比放线菌的数量显著减少。
从不同连作年限花生根际中共分离出细菌1278株，真菌2094株，放线菌2152株。从中得到优势细菌10株，优势真菌8株，优势放线菌9株。采用培养性状、形态特征、生理生化试验及16SrDNA序列分析相结合的方法对分离到的优势细菌和放线菌进行鉴定;采用培养性状、形态特征和ITS序列分析相结合的方法对分离到的优势真菌进行鉴定。
经鉴定，未种花生的根际中优势细菌分别为芽孢杆菌属Bacillussp.、耐盐节杆菌Arthrobacterpascens和丁香假单胞菌Pseudomonassyringae，优势真菌为嗜松青霉Penicilliumpinophilum和产紫青霉Penicilliumpurpurogenum，优势放线菌为秋吉链霉菌Streptomycesakiyoshiensis和天蓝色链霉菌Streptomycescoelicolor;种植1年花生根际优势细菌为Leifsoniaxyli和氯酚节杆菌Arthrobacterchlorophenolicus，优势真菌为枝状枝孢菌Cladosporiumcladosporioides和产紫青霉Penicilliumpurpurogenum，优势放线菌为紫红链霉菌Streptomycesviolaceoruber和华丽黄链霉菌Streptomycesflaveus;花生连作2年根际中优势细菌为黄色微杆菌Microbacteriumflavescens和鞘氨醇单胞菌属Sphingomonassp.，优势真菌为哈茨木霉Hypocrealixi和外瓶霉Exophialapisciphila，优势放线菌为Streptomycespanaciterrae和不产色链霉菌Streptomycesachromogenes;连作4年土壤中优势细菌为巴氏菌属Pasteurellasp.和简单芽孢杆菌Bacillussimplex，优势真菌为微紫青霉Penicilliumjanthinellum和产紫青霉Penicilliumpurpurogenum，优势放线菌为假浅灰链霉菌Streptomycespseudogriseolus和纤维素链霉菌Streptomycescellulosae;连作7年优势细菌为巨大芽孢杆菌Bacillusmegaterium和Leifsoniaxyli,优势真菌为曲霉Aspergillussp.和大丽轮枝菌Verticilliumdahliae，优势放线菌为Streptomycespanaciterrae和金色链霉菌Streptomycesaureus。
连作后花生根际中的优势菌种类有明显变化。Leifsoniaxyli是种植1年和连作7年花生根际的优势细菌;Penicilliumpurpurogenum是种植1年花生和连作4年花生根际的优势真菌;Streptomycespanaciterrae是连作2年和连作7年花生根际的优势放线菌。其它的优势菌在不同连作年限根际中也能分离到，但不是该连作年限根际的优势菌。