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目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)逆转录酶在外周血单个核细胞(PBMCs)中的表达与乙型病毒性肝炎临床的关系。方法:选择70例乙型病毒性肝炎病人,其中急性肝炎19例,慢性肝炎轻度12例,中度13例,慢性肝炎重度11例,肝炎肝硬化15例。另外有10例HBsAg阴性的健康人作为对照。分别提取其PBMCs中的总RNA,经无RNA酶的DNA酶Ⅰ消化去除残存的基因组DNA后逆转录合成cDNA。以HBVP基因区设计合成逆转录酶引物进行PCR扩增,以检测HBV逆转录酶的表达情况。并对1例阳性标本进行了克隆和测序,即将从阳性标本中获得的379bp的扩增片段纯化后与T-Easy载体连接,转化于大肠杆菌DH5α中,通过蓝白斑选择及酶切鉴定筛选出阳性克隆,提取重组质粒进行序列测定。将所得序列通过Internet与GenBank数据库中已知核苷酸序列进行同源性分析。结果:所得基因序列为379个核苷酸,与实验设计相符;与HBV adw2亚型标准一级结构比较,379个核苷酸中只有24个不同,因此结果真实可靠。健康人对照组无1例HBV逆转录酶阳性表达;急性乙肝病人组阳性表达率较低,为5.3%(1/15);慢性乙肝病人组总阳性表达率为33.3%(12/36);慢性乙肝病人轻度、中度、重度组阳性表达率较高,分别为25.9%(3/12)、23.1%(3/13)和54.5%(6/11);肝硬化病人组阳性表达率为26.7%(4/15)。急性乙肝病人组与慢性乙肝病人组阳性率差别有统计学意义(P<0.05);慢性乙肝病人轻度、中度和重度组(包括肝硬化基础上的重度乙肝病人)之间阳性率经卡方检验差别也有统计学意义(P<0.05);但慢性乙肝病人组与肝硬化病人组阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。PBMCs中HBV逆转录酶表达阳性率与血清HBeAg、HBV DNA阳性率之间无相PBMCS中HBV逆转录酶表达与临床乙型肝炎的关系关性(厂0.164;二0.07),差别均无统计学意义(P>0.05)。另外,乙肝病人有家族史的PBMCs中逆转录酶阳性表达率占37.0%(10/27),而无家族史的占仅16.3%(7/43),两者有相关性(r=0.229),差别有统计学意义(P<0.05)。结论:HBV逆转录酶在PBMCs中可独立复制,它的表达与乙型病毒性肝炎的慢性化、重度化及其家族聚集性有密切相关性。可作为早期诊断的指标之一。