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头颈部肿瘤中最具侵袭和转移能力的癌症是鼻咽癌,其在中国华南地区具有很高的发病率。鼻咽癌临床主要的治疗方法是放疗结合化疗,癌症的远处转移和复发是其治疗失败的主要原因。我们从山竹的果壳和树皮中分离和提取出一种具有抗肿瘤活性的氧杂蒽酮类单体化合物FLBG-B。尽管国内外学者对此化合物与肿瘤的关系有所研究,但是FLBG-B对鼻咽癌的作用效果及机制研究尚未见报道。我们研究显示,FLBG-B显著抑制鼻咽癌细胞HK1和HONE1的细胞增殖活力,并且该抑制作用呈剂量依赖性。深入探究发现,FLBG-B不仅可以通过调节周期相关蛋白阻滞鼻咽癌细胞的细胞周期,还可以通过调控EMT相关蛋白抑制鼻咽癌细胞的迁移和侵袭能力,除此以外,我们通过β-半乳糖苷酶试剂盒及透射电镜发现,FLBG-B可以诱导鼻咽癌细胞发生衰老和坏死。综上实验结果,FLBG-B具有显著的抗鼻咽癌作用。本研究为将FLBG-B开发成治疗鼻咽癌的新型药物奠定了一定的实验和理论基础。目的:通过体外实验模型,探讨源于山竹的天然产物单体FLBG-B,对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其分子机制。方法:通过MTS方法检测山竹单体化合物FLBG-B对鼻咽癌细胞株HONE1和HK1增殖活力的影响;应用平板克隆形成实验检测FLBG-B对鼻咽癌细胞株克隆形成能力的影响;通过Transwell小室检测FLBG-B对鼻咽癌细胞株迁移及侵袭能力的影响;通过Western blot方法检测FLBG-B对HONE1和HK1细胞上皮间充质转化（EMT）相关标志性蛋白及周期调控相关蛋白表达的影响和可能的信号通路;通过q-PCR检测FLBG-B对鼻咽癌细胞E-cadherin在转录水平上的调节作用;通过β-半乳糖苷酶试剂盒检测FLBG-B对鼻咽癌细胞株细胞衰老的影响;通过透射电镜实验进一步检测FLBG-B对鼻咽癌细胞株亚细胞超微结构的影响。结果:MTS结果显示FLBG-B可显著抑制鼻咽癌细胞HK1和HONE1的增殖活力,并和浓度呈正相关作用,其作用两株细胞24 h的IC50分别为12.57±0.01μM和10.91±0.89μM;平板克隆形成实验显示,随着FLBG-B给药浓度的增加,鼻咽癌细胞的克隆形成率逐渐降低;Transwell小室迁移和侵袭实验显示,与对照组相比,FLBG-B的给药浓度为7.5μM时,HK1和HONE1细胞穿过小室的数量明显减少,表明FLBG-B可抑制鼻咽癌细胞株的迁移和侵袭能力。Western blot检测发现FLBG-B呈剂量依赖性地下调细胞周期相关蛋白CDK2、Cyclin D1和Cyclin A2的表达水平,同时上调p21和p27的表达水平。另外,FLBG-B还可下调EMT相关蛋白p-Vimentin,Snail及Slug的表达水平,同时上调E-cadherin的表达水平;q-PCR结果显示,10μM FLBG-B可以显著上调E-cadherin的mRNA的水平。细胞衰老实验显示,和对照组相比,7.5μM FLBG-B可以诱导HONE1细胞发生衰老,而对HK1并没有明显的衰老诱导作用;电镜观察可发现FLBG-B作用鼻咽癌细胞HK1后,细胞内的线粒体肿胀,空泡变性,细胞呈现出坏死状态,且呈时间和剂量依赖性。结论:FLBG-B对鼻咽癌细胞株HK1和HONE1的增殖和克隆形成能力有显著抑制作用,并且呈剂量依赖性;FLBG-B可以通过调节细胞周期蛋白CDK2、Cyclin D、Cyclin A2、p21和p27的表达水平,阻滞鼻咽癌细胞的细胞周期;FLBG-B抑制鼻咽癌细胞迁移和侵袭能力,其机制与调节鼻咽癌细胞EMT相关蛋白E-cadherin、p-Vimentin、Snail和slug有关;FLBG-B在转录水平上增加E-cadherin的表达。FLBG-B导致HONE1细胞发生细胞衰老,但对HK1细胞并无显著的细胞衰老诱导作用;FLBG-B可诱导鼻咽癌细胞HK1发生坏死,且随着药物浓度和作用时间的增加,细胞坏死程度越高。