针刺“内关”、“神门”对焦虑模型大鼠心脏ANP及其受体表达的影响

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目的:探索针刺“内关”、“神门”腧穴对慢性不可预知应激(chronic unpredictable stress,CUS)性焦虑模型大鼠心脏心房利钠肽(Atrial natriuretic peptide,ANP)的分泌及其受体表达的影响,为针刺“宁心安神”防治焦虑障碍的机理研究提供针刺“宁心”方面的实验依据。方法:选用清洁级SD雄性大鼠,依据体重将动物进行随机分组,分为模型组、空白组、针刺组,共3组。模型组和针刺组均以慢性不可预知应激刺激方法造模15天。针刺组选择单侧“内关”、“神门”穴区施予电针治疗,隔日一次,左右交替,共治疗8天。电针参数选择疏密波、电压1-3v、频率15-25Hz,每次15min。以高架十字迷宫和敞箱实验测试大鼠的焦虑行为,利用放射免疫法检测血浆ANP的含量,运用免疫组化法检测心房中ANP及其A型受体(natriuretic peptide receptor type A,NPR-A)的水平,以原位杂交法检测心房中A型受体的mRNA (natriuretic peptide receptor type A mRNA,NPR-A mRNA)的表达。结果:1、行为学结果:(1)高架十字迷宫行为学数据显示,与空白组相比照,模型组的OE%值下降明显(P<0.05),说明造模成功;与模型组相比较,针刺组OE%值出现显著上调(P<0.05);模型组较空白组OT%值有所下降,而针刺组相比模型组OT%值有上升趋势,虽然各组比较未现统计学差异,但针刺组更接近空白组。(2)敞箱实验结果,在垂直运动变化上,模型与空白相比,呈现减少的趋势,针刺组与模型相比则显现出增多的趋势;水平移动格数,针刺组也靠近空白组,敞箱实验结果的趋势总体与十字迷宫实验有一致性。行为学测试结果表明针刺有一定抗焦虑作用。2、血浆ANP浓度:与空白组相比,模型组ANP浓度明显升高(P<0.05);针刺组与模型组相比,ANP水平有所降低,且接近空白组;结果说明慢性应激焦虑模型大鼠血浆ANP的分泌呈现亢进,而针刺对血浆ANP的增高有一定的抑制作用趋势。3、心房ANP相关指标结果:(1)ANP的水平:①在右心房,与空白组相比,模型组ANP的光密度值明显升高(P<0.05);针刺组与模型组相比,ANP光密度值明显降低(P<0.01);结果显示慢性应激造模可使大鼠右心房组织的ANP表达增强,针刺显示出抑制作用。②在左心房,与空白组相比,针刺组ANP的光密度值显著升高,而针刺较模型组稍有下降,组间未见统计学差异。(2)心房NPR-A的水平:①于右心房,各组间比较未现统计学差异;②于左心房,与空白组相比,模型组NPR-A的光密度值有升高的趋势,针刺组与模型组相比NPR-A光密度值显著降低(P<0.05),这表明针刺对左心房NPR-A水平的增高显示出抑制作用。(3) NPR-AmRNA的表达水平:①在右心房,针刺组NPR-A mRNA表达较模型组显著降低(P<0.01),表示针刺对右心房NPR-AmRNA表达有一定影响;②在左心房,NPR-AmRNA表达模型组较空白组显著升高(P<0.01),针刺组较模型组有明显降低(P<0.05),针刺组接近空白组,说明针刺对焦虑模型大鼠NPR-A mRNA的增高也显示抑制作用。结论:针刺“内关”、“神门”穴区对慢性不可预知性应激焦虑模型大鼠有一定程度的抗焦虑作用;干预心房ANP的合成与分泌、以及心房ANP受体及其基因表达,可能是针刺发挥“宁心”作用的重要途径之一
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