无酶免标生物传感器的构建及在食品安全检测中的应用

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铜离子广泛的存在于环境中,在人体中扮演着重要的角色,如可帮助生成红细胞,充当神经递质和各种具有生理功能酶的辅助因子。然而,铜离子具有难降解,毒性大和易积累等特点,过量积累会危害人体健康。抗氧化剂(TBHQ)可以阻止或减缓氧化反应而起到延长保质期的作用,但是过量添加抗氧化剂就会对人类健康造成威胁,引发癌变等严重后果。在AR/H2O2(AR:茜红素)体系中,Cu2+具有卓越的类过氧化物酶活性,能够催化无荧光物质AR生成荧光物质试卤灵,基于此现象我们构建了一种无酶、免标、简便的荧光生物传感用于Cu2+检测。实验中为确保检测方法的灵敏性和可靠性,对主要影响因素H202的量和反应时间进行优化,最佳优化条件为8mMH2O2,7h反应时间。铜离子检测线范围为1-100 nM,最低检测限为1 nM,相关性系数R2为0.996。选择纯净水和矿泉水作为实际样品进行添加回收实验,矿泉水回收率为105-120%,纯净水回收率为97-120%。DNA因具有可设计性强、物化性质稳定、易获得等优点在新型纳米传感器领域被广泛使用,在比色TMB/H2O2/Hemin(TMB,3,3’,5,5’-四甲基联苯胺)反应体系中,基于K+、Cu2+作用调控DNA类酶催化活性成功构建AND-OR-INH,AND-INH和OR-INH等级联逻辑门检测TBHQ,其优化G-DNA浓度为400 nM,K+浓度20 mM,Cu2+浓度为40 μM和20 μM。同时,对TBHQ进行检测线范围是5-800 nM,最低检测限为5 nM,相关性系数为0.998。
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