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目的:临床观察到化毒补虚方能改善晚期肺癌患者的临床症状,提高机体免疫功能,改善生存质量等,可是具体作用机制仍不明确。本实验利用血清药理学方法,将化毒补虚方含药血清作用于人肺腺癌A549细胞,通过不同方法观察其对A549细胞的影响,以了解化毒补虚方治疗肺癌的作用机理,为其临床应用提供可能的理论和实验依据。 方法:制备化毒补虚方含药血清,MTT法检测空白血清组、化毒补虚方低(12.5%含药血清组)、中(25%含药血清组)、高(50%含药血清组)剂量组和顺铂组对人肺腺癌A549细胞增殖的影响,Annexin V-FITC/PI双染色流式法检测各组血清对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响,SABC免疫组织化学法检测各组血清对人肺腺癌A549细胞p53、p16蛋白表达的影响。 结果:化毒补虚方低、中、高剂量组对人肺腺癌A549细胞的增殖均有抑制作用,且随时间的延长、药物浓度的增加,抑制作用越明显;顺铂组对人肺腺癌A549细胞的增殖抑制作用高于50%含药血清组,差异具有极显著性(P<0.01)。 细胞经含药血清处理后,凋亡增多,凋亡率明显高于空白对照组,其差异具有极显著性(P<0.01),且凋亡情况与时间、药物浓度呈正相关,但仍不及顺铂组。 化毒补虚方低(12.5%含药血清组)、中(25%含药血清组)、高剂量组(50%含药血清组)均能抑制人肺腺癌A549细胞突变型p53蛋白的表达,与空白血清组比较,差异具有显著性(P<0.01);低、中、高各剂量组之间也有显著差异(P<0.01),50%含药血清组与顺铂组相比差异也具有极显著性(P<0.01)。 化毒补虚方低(12.5%含药血清组)、中(25%含药血清组)、高剂量组(50%含药血清组)均能上调人肺腺癌A549细胞p16蛋白的表达,与空白血清组比较,差异均具有显著性(P<0.01);低、中、高各剂量组之间也有显著差异(P<0.01);50%含药血清组与顺铂组相比没有明显差异,但25%含药血清组与顺铂组比较具有极显著性(P<0.01)。 结论:化毒补虚方可抑制人肺腺癌A549细胞的增殖,诱导其凋亡,其机制之一是上调人肺腺癌A549细胞p16蛋白的表达,下调突变型p53蛋白的表达。