温度敏感性离子通道TRPV3在人类膝关节软骨及滑膜组织中的表达

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目的:检测温度敏感性离子通道TRPV3(thermosensitive ion channnel TRPV3)在人的膝关节滑膜及软骨标本中的分布,对人滑膜及软骨组织中TRPV3所起的作用进行研究。方法:集取各种年龄人正常的膝关节滑膜及软骨分别10例和5例,膝骨关节炎软骨及滑膜组织各5例,每例软骨组织均取自胫骨平台,滑膜组织标本均取自关节囊内层,分装在-70℃冰箱中。番红“O”染色证实软骨标本有无退行性变。首先分出5例OA软骨标本为OA组,取5例60-69岁为正常对照组,运用Western blot、RT-PCR检测正常和OA软骨、滑膜中TRPV3有无表达分布及趋势,再用免疫荧光和免疫组化方法测得TRPV3在正常及OA软骨中分布表达以及趋势。然后Western blot检测正常软骨标本,所得条带测灰度值,分30-39岁组和60-69岁组各5例,最后采取Western blot检测TRPV3位于两组软骨中的趋势。结果:番红“O”染色OA软骨标本显微镜观察异常,色度及分层模糊,细胞之间着色较低。正常软骨标本染色均匀,浅层到深层染色由浅至深,显示无退行性改变;RT-PCR、Western blot、免疫荧光与免疫组化方法在软骨及滑膜组织中都有TRPV3表达,免疫荧光检测TRPV3在软骨细胞膜上有表达,且OA较正常软骨表达较强;考马斯亮蓝染色控制上样量,检测TRPV3条带灰度值分析,结果显示TRPV3的表达量OA组高于正常对照组,t检验有统计意义(P<0.05)。测得两个年龄组正常软骨标本TRPV3的表达量,结果表明TRPV3的表达随年龄的增加而升高,t检验有统计意义(p<0.05)。结论:TRPV3与骨关节炎有着密切的联系,在骨关节炎的发生发展当中起一定作用,为关节软骨损伤的防治提供新靶点。
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