论文部分内容阅读
研究目的选取气虚体质健康人和慢性浅表性胃炎脾气虚证患者外周血白细胞miRNA,与平和体质健康人相对照,探究在气虚体质-慢性胃病脾气虚证发展过程中参与的miRNA及其生物学功能。研究方法受试者在2016年9月至2017年7月间招募于北京中医药大学东方医院肝胆脾胃科门诊,按一定诊断标准、纳入与排除标准筛选后,选取平和体质健康人3例、气虚体质健康人2例、慢性浅表性胃炎脾气虚证患者3例进行研究,各组间性别与年龄均,无统计学差异。分别分离平和体质健康人、气虚体质健康人及慢性浅表性胃炎脾气虚证患者外周血白细胞,提取总RNA后进行高通量测序,分析各组间miRNA差异表达谱,根据数据库中已知miRNA靶基因以GO和KEGG分析预测差异表达miRNA所参与的生物学过程。研究结果对平和体质健康人、气虚体质健康人和慢性浅表性胃炎脾气虚证患者外周血白细胞miRNA表达谱进行HCL聚类分析,miRNA表达谱可很好地将三组区分开,其中又以平和体质健康人组与气虚体质健康人组距离较近,慢性浅表性胃炎脾气虚证组与前两组距离相对较远,符合实验预期。气虚体质健康人与平和体质健康人相比有31条miRNA存在差异表达(P<0.05),其中13条上调(fold change>1.5),8条下调(fold change<0.5),经GO分析及KEGG通路分析,可见GO生物学过程分析主要与胞外基质、细胞连接、信号转导、物质和能量代谢等过程相关,KEGG分析主要与胞外基质、细胞连接、信号转导等通路相关,与GO生物学分析结果类似,其主要涉及的信号通路包括Hippo信号通路、TGF-β信号通路、FOXO信号通路以及p53信号通路等;慢性浅表性胃炎脾气虚证患者与平和体质健康人相比有38条miRNA存在差异表达(P<0.05),其中 25 条上调(fold change>1.5),13 条下调(foldchange<0.5),经 GO分析及KEGG通路分析,可见GO生物学过程分析主要与物质合成与代谢、基因表达等过程相关,KEGG分析主要与胞外基质、物质合成与代谢、信号转导等通路相关,其主要涉及的信号通路包括Hippo信号通路和p53信号通路等。其中miR-145-5p和miR-146a-3p随平和体质健康人-气虚体质健康人-慢性浅表性胃炎脾气虚证患者的顺序成递进趋势。对这两条miRNA进行GO生物学过程分析及KEGG通路分析,可见两条miRNA共同参与的生物学过程主要有神经营养因子Trk受体信号通路和脂肪酸生物合成与代谢等,共同参与的通路主要是Hippo信号通路。结论在气虚体质健康人和慢性浅表性胃炎脾气虚证患者外周血白细胞中均可观测到miR-145-5p和miR-146a-3p的上调。神经营养因子Trk受体信号通路、Hippo信号通路以及脂肪酸生物合成与代谢等过程与慢性浅表性胃炎脾气虚证发病机制之间可能存在某种联系,值得进行进一步探究。