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动脉粥样硬化早期血管内皮细胞表面相关的白细胞黏附分子表达量即上调,这为超声结合靶向微泡对特定血管进行无创增强造影提供了依据,但不同抗体表面覆盖率的靶向微泡与内皮细胞的黏附规律尚不明确。该研究选择血管细胞黏附因子-1(VCAM-1)为分子靶标,抗 VCAM-1抗体作为靶向配体,以多步生物素—链霉亲和素桥连法将配体连接到微泡表面制备成靶向微泡。以人脐静脉内皮细胞(HUVEC-CS)作为细胞模型,分别采用免疫细胞化学法检测VCAM-1的表达情况、倒置荧光显微镜观察法观察微泡及细胞形态、荧光分光光度计对微泡表面抗体表征、结合平行板流动腔以模拟生理状态下的血流环境。 研究了细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激内皮细胞后VCAM-1的表达情况、不同浓度的藻红蛋白标记的链霉亲和素(PE-streptavidin)与微泡的结合率,以及由此推导出的抗体表面覆盖率、并且以不同抗体表面覆盖率的微泡(22.2%,33.2%,63.3%,100%),在平行板流动腔模拟的不同剪切流场环境下(2 dynes/cm2,5 dynes/cm2),与内皮细胞进行黏附。 研究结果表明: (1)在LPS刺激下,内皮细胞VCAM-1表达显著上调; (2)不同抗体表面覆盖率的微泡与内皮细胞的黏附显示一定的规律性,随着抗体表面覆盖率的增加,微泡与内皮细胞的黏附个数也随之增多,在100%的抗体表面覆盖率的情况下,微泡与内皮细胞的黏附个数最多,2 dynes/cm2下高约34倍,5 dynes/cm2下高约50倍; (3)不同的剪切流场环境下,微泡与内皮细胞的特异性黏附存在差异,低切应力流场下黏附的微泡比高切应力流场下黏附的微泡多,平均高约3倍,最高可达近4倍。本研究表明在体外条件下,制备的靶向微泡可有效黏附在炎性内皮细胞表面,从而为相关血管疾病的早期诊断提供一定的依据。