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目的研究游离脂肪酸对体外培养大鼠胰岛功能和胰岛细胞凋亡的影响及其机制。方法1、将分离的SD大鼠胰岛按培养液中游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)的浓度和培养时间的不同分为六组:NC1组(葡萄糖浓度为5.6mmol/L培养1天),FFA1组(FFA浓度为0.25mmol/L培养1天),FFA2组(FFA浓度为0.5mmol/L培养1天);NC2组(葡萄糖浓度为5.6mmol/L培养3天),FFA3组(FFA浓度为0.25mmol/L培养3天),FFA4组(FFA浓度为0.5mmol/L培养3天)。2、采用双硫腙法鉴定胰岛细胞团;3、体外葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)实验,放射免疫法检测胰岛素水平;TUNEL法检测胰岛细胞的凋亡情况;4、半定量逆转录-多聚酶链反应(SQ RT-PCR)技术检测胰岛中胰岛素基因、PDX-1、Caspase-3、Bax等基因mRNA的表达。结果1、5.6 mmol/L葡萄糖刺激下,FFA1组、FFA2组胰岛素分泌量均低于NC1组(P<0.05),且FFA2组胰岛素分泌量低于FFA1组(P<0.05);15.6 mmol/L葡萄糖刺激下,FFA1组、FFA2组胰岛素分泌量均低于NC1组(P<0.05),且FFA2组胰岛素分泌量低于FFA1组(P<0.05);5.6 mmol/L葡萄糖刺激下,FFA3组、FFA4组胰岛素分泌量均低于NC2组(P<0.05),且FFA4组胰岛素分泌量低于FFA3组(P<0.05);15.6 mmol/L葡萄糖刺激下,FFA3组、FFA4组胰岛素分泌量均低于NC2组(P<0.05),且FFA4组胰岛素分泌量低于FFA3组(P<0.05)。2、FFA1组、FFA2组胰岛素基因、PDX-1表达均低于NC1组(P<0.05),且FFA2组胰岛素基因、PDX-1表达低于FFA1组(P<0.05);FFA3组、FFA4组胰岛素基因、PDX-1表达均低于NC2组(P<0.05),且FFA4组胰岛素基因、PDX-1表达低于FFA3组(P<0.05)。3、FFA1组、FFA2组胰岛细胞凋亡率均高于NC1组(P<0.05),且FFA2组胰岛细胞凋亡率高于FFA1组(P<0.05);FFA3组、FFA4组胰岛细胞凋亡率均高于NC2组(P<0.05),且FFA4组胰岛细胞凋亡率高于FFA3组(P<0.05)。4、FFA1组、FFA2组Caspase-3、Bax基因表达均比NC1组增加(P<0.05),且FFA2组Caspase-3、Bax基因表达高于FFA1组(P<0.05);FFA3组、FFA4组Caspase-3、Bax基因表达均比NC2组增加(P<0.05),且FFA4组Caspase-3、Bax基因表达高于FFA3组(P<0.05)。结论1、高浓度FFA环境可抑制大鼠胰岛β细胞的分泌功能,表现为基础胰岛素分泌水平降低,葡萄糖刺激后胰岛素的合成和分泌能力下降,并且FFA浓度越高,抑制作用越明显。2、高浓度FFA环境抑制胰岛素基因和PDX-1的表达,且FFA浓度越高抑制作用越明显。3、高浓度FFA可使大鼠胰岛细胞凋亡明显增加,且FFA浓度越高细胞凋亡越明显,细胞内的Caspase-3、Bax基因表达增多,提示胰岛细胞凋亡可能与促凋亡基因表达增加有关。