【摘 要】
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目的探讨280nm LED-紫外线（Light Emitting Diode-Ultraviolet,LED-UV）对HL-60细胞线粒体膜电位变化及细胞内活性氧生成的影响,同时研究HL-60细胞凋亡与线粒体膜电位及活性氧生成的关系。方法取对数生长期的HL-60细胞作为研究对象,280nm LED-UV紫外线作为光源,以不同剂量（J/m2）照射HL-60细胞,实验分为两组,对照组与实验组,对照组为
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目的探讨280nm LED-紫外线（Light Emitting Diode-Ultraviolet,LED-UV）对HL-60细胞线粒体膜电位变化及细胞内活性氧生成的影响,同时研究HL-60细胞凋亡与线粒体膜电位及活性氧生成的关系。方法取对数生长期的HL-60细胞作为研究对象,280nm LED-UV紫外线作为光源,以不同剂量（J/m2）照射HL-60细胞,实验分为两组,对照组与实验组,对照组为A组（0J/m2）,实验组分为B-E亚组（8J/m2、15J/m2、30J/m2、60J/m2）,将各组细胞置于含10%胎牛血清的IMDM培养液、37℃、5%CO2、饱和湿度的条件下培养2小时,倒置显微镜下观察各组细胞的生长状态;采用jc-1染色及流式细胞仪检测HL-60线粒体膜电位变化;流式细胞仪、Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡;DCFH-DA（2,7dichiorofluorescein diacetate）活性氧检测试剂盒检测HL-60细胞活性氧的变化。结果1.HL-60细胞生长状态:对照组细胞圆形透亮、形态规则、排列紧密。当LED-UV紫外线剂量为8J/m2时,实验各组细胞开始出现细胞皱缩,随着剂量的增大,细胞透亮度减低、形态变得不规则,可见大量细胞碎片,以D、E组最明显。2.HL-60细胞凋亡率:A组HL-60细胞凋亡率为（3.01±0.72）%,B-E亚组分别为（7.45±0.31）%、（11.86±0.56）%、（21.29±0.25）%、（7.80±0.14）%,各组间细胞凋亡率的比较差异有统计学意义（F=3314.97,P值均<0.01）,其中D组凋亡率最高,E组凋亡率明显低于D组（P<0.01）。3.HL-60细胞线粒体膜电位的变化:A组线粒体膜电位强度为126.22±6.81,B-E亚组分别97.86±2.25、82.65±4.22、72.35±3.12、85.28±3.52,各组间线粒体膜电位变化的比较差异有显著统计学意义（F=623.09,P<0.01）,其中C组与E组比较差异无统计学意义（P>0.05）,D组线粒体膜电位最低,而E组显高于D组（P<0.01）。4.HL-60细胞活性氧的变化:A组HL-60细胞内活性氧生成率为（1.21±0.11）%,B-E亚组分别为（8.05±0.81）%、（18.56±0.31）%、（29.80±0.15）%、（17±0.22）%,各组间比较差异有显著统计学意义（F=12502.94,P<0.01）,其中D组活性氧生成率最高,而E组明显低于D组（P<0.01）。5.HL-60细胞凋亡与线粒体膜电位的关系:HL-60细胞凋亡率与线粒体膜电位变化呈高度负相关,r值为-0.82,P<0.01。6.HL-60细胞凋亡与活性氧的关系:HL-60细胞凋亡率与活性氧的变化呈高度正相关,r值为0.936,P<0.01。结论1.280nm LED-UV能够使HL-60细胞凋亡,在8-30J/m2范围内呈剂量依赖性,剂量为30J/m2时凋亡率最高,60J/m2时凋亡率明显降低。2.280nm LED-UV能够使HL-60细胞线粒体膜电位降低,在8-30J/m2范围内呈剂量依赖性,剂量为30J/m2时线粒体膜电位最低,60J/m2时线粒体膜电位明显降低。3.280nm LED-UV能够使HL-60细胞活性氧生成增加,在8-30J/m2范围内呈剂量依赖性,剂量为30J/m2细胞内活性氧生成最高,60J/m2时细胞内活性氧生成明显增加。4.HL-60细胞凋亡率与线粒体膜电位变化呈高度负相关,线粒体膜电位越高,细胞凋亡率越低。5.HL-60细胞凋亡率与活性氧的变化呈高度正相关,活性氧生成率越高,细胞凋亡率越高。
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