知母—黄柏药对有效部位群质量标准研究及降血糖、降血脂作用初探

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药对,又称对药、对子,专指临床上常用的、相对固定的两味药组成的方剂。药对是方剂的核心和基本结构,是中药复方配伍的最简单、最基本和最常见的形式。药对组成虽然简单,但配伍符合中医“七情和合”理论和组合法度,具备了复方的基本主治功能,成为中医遣方用药的特色之一,具有紧扣病机、功用专一、药简力宏、疗效确切等特点。知母和黄柏是临床相当常用的清(虚)热药对之一。二者伍用最早出自金·李杲《兰室秘藏》滋肾丸。现在药理研究表明,黄柏总生物碱中的主要成分小檗碱能改善糖尿病肾病大鼠肾功能不全。知母总皂苷能够显著提高糖尿病小鼠的糖耐量,降低实验性糖尿病小鼠的空腹血糖。本课题选用知母-黄柏药对进行研究,以期为进一步揭示知母-黄柏的药对药理作用物质基础,为有效部位群的研究和新制剂的开发提供方法与依据。本文在综述了知母-黄柏药对国内外研究现状的基础上,主要研究了知母-黄柏药材混提物的含量测定;知母-黄柏药对有效部位群的提取纯化工艺;知母-黄柏有效部位群的质量标准和知母-黄柏药对有效部位群的降血糖、降血脂作用。1.知母-黄柏药材混提物的含量测定研究采用紫外分光光度法和高效液相法,以盐酸小檗碱、黄柏碱、知母皂苷BⅡ为对照,测定混提物中总生物碱、总皂苷、盐酸小檗碱、黄柏碱、知母皂苷BⅡ的含量。2.知母-黄柏药对提取纯化工艺的研究本研究在关红晖师姐研究基础上进一步的完善了知母-黄柏药对中总皂苷总生物碱提取工艺。通过单因素考察,确立了最佳的提取工艺。纯化工艺采用大孔树脂对总皂苷和总生物碱进行精制纯化。通过对各个影响因素的考察,得到最佳的纯化工艺:AB-8型大孔吸附树脂分离纯化,药材与干树脂重量比1:1,上样液浓度为0.05g生药/mL,依次用10BV蒸馏水、10BV70%乙醇以1~3mL/min的洗脱速度洗脱,收集70%乙醇部分,减压浓缩至干,真空干燥,得到的有效部位群的纯度在50.0%以上。3.知母-黄柏有效部位群质量标准研究经过对10批知母-黄柏药材中总皂苷及总生物碱有效部位群的提取、纯化,初步建立了以盐酸小檗碱、黄柏碱、知母皂苷BⅡ为对照品的知母-黄柏药对有效部位群TLC鉴别方法;并建立了知母-黄柏有效部位群中总皂苷及总生物碱的UV含量测定方法和有效部位群中盐酸小檗碱、黄柏碱及知母皂苷BⅡ的HPLC法含量测定方法,初步建立有效部位群的质量标准。4.知母-黄柏有效部位群降血糖及降血脂初步研究采用STZ诱导小鼠形成高血糖模型的方法,对知母-黄柏药对有效部位群的降血糖进行了初步探讨,结果表明有效部位群具有一定的降血糖作用。采用高脂饲料引起的肥胖大鼠脂质代谢紊乱的方法,对知母-黄柏药对有效部位群的降血脂作用进行了初步探讨,结果表明有效部位群降血脂效果并不显著。
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