目的:理冲生髓饮是由淫羊藿、黄芪、人参、水蛭、鹿茸、莪术、三棱、浙贝母八味药材组成的中药复方制剂,对卵巢癌的治疗有显著的疗效。本实验是以LCSSY课题组研究为基础,确定黄酮、皂苷、多糖和蛋白质均为有效成分,并建立LCSSY多成分含量测定的分析方法,结合多指标正交试验筛选出最佳工艺参数,并测定具有代表性有效成分的含量。方法:本实验采用超临界萃取技术结合优化后的醇提法、水提法工艺制备理冲生髓饮。①首先,采用分光光度法,分别建立总黄酮、总皂苷、总多糖和水溶性蛋白质含量的测定方法。总黄酮:以淫羊藿苷为对照品,采用AlC13显色法于415nm处测定醇提液中总黄酮的含量;总皂苷:以齐墩果酸为对照品,采用香草醛-冰醋酸-高氯酸显色法于544nm处测定醇提液中总皂苷的含量;总多糖:以葡萄糖为对照品,结合LCSSY多糖对葡萄糖的换算因子,采用苯酚-硫酸法于489nm处测定水提液中总多糖的含量;蛋白质:以牛血清白蛋白为对照品,采用考马斯亮蓝G-250染色法于595nm处测定水提液中水溶性蛋白质的含量。②然后,采用高效液相色谱法,建立黄酮类和皂苷类HPLC分析方法,色谱柱为Dikma Diamonsil-C18（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为0.1%磷酸水溶液（A）-乙腈（B）,柱温30℃,流速 1.0mL/min,进样量20μL,检测波长270nm（黄酮类）,检测波长203nm（皂苷类）,以毛蕊异黄酮葡萄糖苷、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅰ、人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd和黄芪甲苷为对照品,分别绘制相应的标准曲线,并对线性关系、精密度、重复性、加样回收率以及稳定性进行方法学考察。③最后,结合以上多成分含量测定的分析方法,利用单因素考察结合正交试验分别优选水提法与醇提法的提取工艺。醇提法:以LCSSY中总黄酮、总皂苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅰ、人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd和黄芪甲苷的含量以及浸膏得率为评价指标,选取乙醇浓度、提取时间、提取温度、溶媒用量为考察因素,确定醇提法最佳工艺参数;水提法:以LCSSY中多糖、水溶性蛋白质的含量和醇沉物质量为评价指标,选取加水量、浸泡时间、提取时间、提取次数为考察因素,确定水提法最佳工艺参数。结果:①总黄酮线性范围为0.01～0.1g·L-1,平均加样回收率为100.5%,RSD为1.6 1%;总皂苷线性范围为0.02～0.15g·L-1,平均加样回收率为99.82%,RSD为1.1 5%;总多糖线性范围为0.01～0.1g·L-1,平均加样回收率为99.35%,RSD为1.41%;水溶性蛋白质线性范围为0.1～1.0g·L-1,平均加样回收率为100.2%,RSD为1.89%。②毛蕊异黄酮葡萄糖苷、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅰ线性范围分别为0.1～0.2、0.1～1.0、0.01～0.1g·L-1,平均加样回收率分别为 100.02%、99.64%、99.59%,RSD 分别为 1.83%、1.61%、1.58%;人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd和黄芪甲苷线性范围分别为0.05～0.2、0.1～1.0、0.1～1.0、0.1～1.0、0.1～1.0g·L-1,平均加样回收率分别为99.15%、99.48%、99.69%、99.26%、100.01%,RSD 分别为 1.63%、1.45%、1.38%、1.22%、1.85%。③醇提法:最佳工艺为加入10倍量的60%乙醇浸泡2h后,80℃加热回流提取1.5h,提取2次,并测得总黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅰ、总皂苷、人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd和黄芪甲苷在 LCSSY 中平均含量分别为 2.29%、0.091%,0.26%、0.025%、1.68%、0.081%、0.16%、0.22%、0.22%、0.12%;水提法:最佳工艺为加 1 0 倍量的水浸泡1h后,100℃加热回流提取2h,提取3次,并测得多糖和水溶性蛋白质在LCSSY中平均含量分别为8.53%、0.35%。结论:①采用分光光度法测定总黄酮、总皂苷、总多糖和水溶性蛋白质的含量,其方法精密度、稳定性以及加样回收率均良好,可用于各成分含量测定。②采用HPLC分析法测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅰ、人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd和黄芪甲苷的含量,其方法精密度、重复性、加样回收率以及稳定性均良好,可用于各成分含量测定。③优化后的醇提工艺与水提工艺,有效成分提取率高,稳定性好、可行性强,此工艺合理。为今后规范理冲生髓饮的提取工艺和质量标准控制提供理论依据,对于提高临床疗效具有一定的意义。