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Sirt1是酵母染色质沉默因子(Silent information regulator2, Sir2)的哺乳动物同源体,属于Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶。Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶参与的反应依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamid adenine dinucleotide),这不同于Ⅰ类和Ⅱ类组蛋白去乙酰化酶。Sir2家族的蛋白从细菌到人类都具有高度保守性,人Sirtuins是与Sir2具有同源性的一个家族,其中Sirt1是与Sir2同源性最高的一个成员,在许多生命过程,如细胞凋亡、细胞周期、DNA损伤修复、重组、长寿和基因沉默中都发挥了重要的作用。近年来的研究表明,Sirt1不仅可以去乙酰化组蛋白如组蛋白H3、H4等,而且与很多转录因了和转录辅因了相互作用,调节它们的转录激活作用。这些转录因子包括：p53、FOXO家族、NF-κB(p65)、MyoD等；转录辅因子包括：NcoR,p300、PGC-1α等。原癌蛋白c-Myc/Max复合物是由结构功能相关的亚家族亚单位组成的二聚体。这些成员均有进化保守的亮氨酸拉链(leucine zipper)又称碱性拉链(bZIP)结构域。c-Myc/Max复合物对细胞增殖、凋亡、代谢、肿瘤发生等牛理或病理信号发生应答,通过bZIP结构域的碱性区域与DNA序列结合,调节基因的转录。c-Myc的活性调节是通过多方面来完成的,包括转录调节、翻译后修饰、c-Myc/Max复合物的二聚化及和其他辅助蛋白的相互作用调节。Sirt1与c-Myc间的相瓦作用可能为揭示Sirt1在肿瘤发生过程中的作用提供线索。我们通过生物信息学的方法分析到在Sirt1的启动了区有c-Myc的结合位点。通过在p53缺失的K562、H1299和p53突变的MDA-MB-231细胞中过表达c-Myc,检测到Sirt1mRNA和蛋白水平的上调,ChIP的方法鉴定了c-Myc在Sirt1启动子区的结合,而在p53表达的HeLa和293A中未检测到c-Myc对Sirt1的上调和c-Myc在Sirt启动子区的结合。然后我们通过双荧光素酶报告系统和EMSA确定了c-Myc结合在Sirt1启动子的E-box2区。另一方面我们通过免疫共沉淀和GST-pulldown的方法确定了Sirt1与c-Myc的相瓦作用及具体的介导相瓦作用的结构域。同时通过IP和Western blot确定Sirtl作为去乙酰化酶能够抑制c-Myc的乙酰化水平。在HeLa和293A细胞中通过荧光素酶报告系统检测了Sirtl的过表达在基础水平能够促进c-Myc的转录活性。为了说明Sirtl是如何促进c-Myc的转录活性的,我们在K562中敲低Sirtl的表达量,检测c-Myc的蛋白量,结果显示Sirtl对c-Myc的蛋白量没有明显改变。在293A细胞中过表达Sirtl后也没有检测到外源过表达的c-Myc的蛋白量的改变,说明Sirtl对c-Myc的转录活性的影响不通过影响其蛋白稳定性。于是我们检测了Sirtl是否影响c-Myc与Max二聚体的形成。通过Co-IP的方法发现Sirtl能够增强c-Myc与Max的结合。接着我们在K562、MDA-MB-231细胞中敲低Sirtl的量或过表达Sirtl,用Realtime-PCR的方法检测到Sirtl能够促进c-Myc的下游靶基因hTERT、 cyclinD2、LDHA的转录,同时检测到Sirtl干扰的K562细胞中c-Myc在hTERT的启动了区的结合减弱,与Sirtl能够增强c-Myc与Max的结合的结果一致。最后我们通过MTT和流式细胞分析发现Sirtl的干扰能够抑制K562细胞的增殖,引起G1期的细胞周期的阻滞,但在使用c-Myc的抑制剂10058-F4后Sirtl干扰引起的G1期的细胞阻滞变得不明显。目前对于Sirtl在肿瘤细胞增殖中的作用还存在争议,本研究为阐述Sirtl在肿瘤细胞增殖中的作用提供了新的证据。尽管我们目前还不能下定论Sirtl是癌基因还是抑癌基因,,我们的结果提示Sirtl对肿瘤细胞增殖的影响可能是细胞特异性的,我们仍然需要更多的实验证据来支持这一推断。