研究背景及目的:前列腺癌（prostate cancer,PCa）是导致男性死亡的排名第二的恶性肿瘤,并在所有的肿瘤特异性死亡中排在第五,每年由PCa引起的死亡超过三十万,占男性癌症特异性死亡率的6.6%。去势治疗是晚期PCa常用的治疗方式,但也很容易产生治疗抗性,去势抵抗前列腺癌（castration-resistant prostate cancer,CRPC）患者的5年生存率仅有25.4%。恩杂鲁胺是治疗CRPC的新药,其主要作用是抑制雄激素受体（androgen receptor,AR）入核,然而基因突变、AR剪切体的产生以及肿瘤微环境（Tumor microenvironment,TME）的改变,都是导致恩杂鲁胺治疗失败的潜在原因。在肿瘤的起始发生和不断地进展中,TME发挥了重要的推动作用,一系列的科学研究都关注了TME以及免疫细胞的作用机制。因此,研究PCa的免疫表型分型,及免疫细胞对恩杂鲁胺治疗敏感性的相关机制至关重要,并可以指导PCa患者的临床治疗。方法:本研究获取了1557名前列腺癌患者的基因表达谱及临床预后信息。其中69例患者来自本单位,部分患者的病理组织切片被用来做免疫组织化学染色,验证相关结果。非负矩阵分解（non-negative matrix factorization,NMF）算法和最近模板预测nearest template prediction,NTP)被用来区分不同的免疫亚型分组,从已经发表的文献中收集了能够代表各种免疫细胞类型或宿主抗肿瘤免疫力的基因签名,并通过单样本基因集富集分析来表征化不同免疫亚型的特征。THP-1细胞通过100ng/ml的PMA溶液诱导贴壁,并通过进一步的与前列腺癌细胞共培养后,收获条件培养基。去除杂质碎片后的培养基在120000转超速离心70分钟后获取外泌体,通过透射电子显微镜对收集到的外泌体进行形态观察和拍摄。MTT,Ed U实验被用来测定不同处理组中,前列腺癌细胞对恩杂鲁胺治疗的敏感性。sh ATP1B1敲低慢病毒及mi RNA-320b inhibitor被用来抑制ATP1B1和mi RNA-320b的表达。实时定量PCR用来检测m RNA和mi RNA的表达,Ago2实验用来验证mi RNA和m RNA的相互作用。结果:大约14.9%至24.3%的患者属于免疫激活亚型,与预后良好的无复发生存期相关,免疫治疗在免疫激活亚型患者中更有效。免疫激活亚型和免疫抑制亚型中,巨噬细胞特征都比较高,进一步分析显示,高丰度的M2型巨噬细胞浸润与比较差的临床预后相关,同时,M2型巨噬细胞的浸润越多,ARSI治疗有效时间就越短。我们在C4-2、C4-2B细胞系中,验证了在M2型巨噬细胞共培养的状态下,前列腺癌细胞产生对恩杂鲁胺的耐药性。下游关键基因ATP1B1的表达升高受到了AR的调控,这种调控是来源于M2型巨噬细胞的外泌体中的mi R-320b抑制AR表达导致的。进一步探究发现M2型巨噬细胞的条件培养基处理后,PI3K/AKT通路的表达及活性均升高,敲低ATP1B1或是加入AKT抑制剂之后,肿瘤细胞重新对恩杂鲁胺治疗敏感。在体内实验中,每组小鼠均接收恩杂鲁胺治疗,M2型巨噬细胞+前列腺癌细胞组有着最大的肿瘤尺寸,而加入mi R-320b inhibitor后,恩杂鲁胺的治疗可以有效减小肿瘤大小。结论:本研究确定了一种与临床预后密切相关的新型免疫分子分类器,可以用来筛选适用于抗PD-1/PD-L1治疗的前列腺癌患者。M2型巨噬细胞免疫浸润与恩杂鲁胺耐药性的产生相关,M2型巨噬细胞通过外泌体转运mi R-320b,并影响前列腺癌细胞内AR/ATP1B1/PI3K/AKT通路。抑制mi R-320b或ATP1B1的是治疗前列腺癌恩杂鲁胺耐药的新靶点。