山奈的生药学研究

来源 :新疆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shijinya
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目的:对山奈进行生药学鉴定、化学成分初步分析、红外光谱规律研究、化学成分含量测定、体外抑菌活性的研究,旨在进一步完善山奈在生药学方面的研究,奠定其质量标准的基础,为更好地开发山奈这一天然药用植物的潜在价值提供一定的理论依据。方法:直接观察并记录新鲜山奈、山奈饮片、山奈粉末的性状特征;采用石蜡切片法制作山奈根茎组织横切面装片,采用药典规定的方法制作山奈粉末装片,在显微镜下观察其显微特征并进行拍照;分别向山奈粉末滴加不同试剂浸润,采用紫外分析仪观察浸润的药材粉末在365 nm紫外光下的荧光颜色;采用紫外光谱仪分别对山奈水浸提液、甲醇浸提液、石油醚浸提液进行紫外光谱检测。采用两种及以上检识方法,观察试验反应现象,如颜色反应、沉淀反应及其他相关反应对山奈的水提物和乙醇提取物中的化学成分进行初步分析。使用Spectrum Two型红外光谱仪对山奈原药材及其甲醇提取物、水提取物进行红外光谱检测,在OMNIC软件中将红外光谱数据制作成图,并使用IBM SPSS Statistics 26.0软件对18批山奈原药材的原始数据进行Pearson相关系数分析和系统聚类分析。采用紫外可见分光光度法对不用批次山奈中的总糖及多糖、总氨基酸、总多酚含量进行测定。采用HPTLCS法和HPLC法对7个不同批次山奈中对甲氧基肉桂酸乙酯的含量进行测定,并结合分析生态尺度对这两种方法分析过程的绿色程度进行评价。采用平板打孔法考察了山奈中主要药效成分对甲氧基肉桂酸乙酯对金黄色葡萄球菌、变异链球菌、大肠杆菌的抑制效果,测定该成分对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度。结果:详细描述了山奈的性状特征、显微特征及理化特征,并将相关的图片资料整理归类,选择特征清晰的图片放置于文中。采用两种及以上检识方法对山奈的化学成分进行初步分析,由实验结果可知,山奈中含有糖类成分、有机酸、鞣质及酚类、甾体、皂苷类、生物碱、强心苷、香豆素、内酯及其他酯类、氨基酸、黄酮类成分。分别对山奈原药材及其水提取物和甲醇提取物进行红外光谱整体特征解析,并将这三种物质的红外谱图进行对比,可以发现各谱图之间的峰形和出峰位置差异明显;18批山奈原药材红外光谱数据的Pearson相关系数相差不大,范围在0.932-0.999之间,双侧显著性检验P?0.01,具有显著相关性,并且结合各谱图之间基本一致的峰形及出峰位置来看,这18批山奈含有的官能团基本一致,化学成分基本相同;对18批山奈红外谱图进行系统聚类分析,当距离为5时,可将1-7、9-15、17号分为一类,16、18号分为一类;8号为一类。采用紫外可见分光光度法测定18批山奈总糖的含量为33.53%-59.68%,多糖含量为15.68%-45.91%,总氨基酸含量为0.52%-2.53%,总多酚含量为0.119%-0.362%。HPTLCS法的测定条件良好,薄层板上样品斑点清晰,无杂质干扰,具有良好的分离效果,扫描测定7个批次山奈中对甲氧基肉桂酸乙酯的含量为1.57%-2.69%,HPLC法测得含量为2.76%-3.82%;以分析生态尺度对这两种方法分析过程的绿色度评价来看,HPTLCS法属于优异的绿色分析技术,HPLC法属于可接受的绿色分析技术(分析生态尺度得分:HPTLCS法得分为83;HPLC法得分为75),可以认为HPTLCS法是更为绿色环保的分析手段。从体外抑菌实验结果来看,对甲氧基肉桂酸乙酯对金黄色葡萄球菌具有中强度的抑制效果(浓度为40.0、20.0 mg/m L时,抑菌圈大小分别为13.77?0.15 mm、9.22?0.11 mm,MIC为1.25 mg/m L)。结论:本课题为山奈的生药学鉴定提供了详实的鉴定依据,对山奈进行化学成分初步分析、山奈的红外光谱规律研究、山奈化学成分的含量测定、建立HPTLCS法与HPLC法对山奈中对甲氧基肉桂酸乙酯含量测定与两种方法绿色程度的比较以及对甲氧基肉桂酸乙酯的体外抑菌活性研究等内容,进一步完善了山奈在生药学方面的研究,为山奈的质量评价及进一步开发山奈潜在的药用价值提供一定的科学依据。
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