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前言 目前,自体血管移植已广泛应用于临床动脉系统血流重建和肢体动脉损伤的修复。但自体血管来源极为困难和有限。且紧急情况下进行血管取材费时费力,使本已有限的手术空间更加狭小、手术时间延长,对救治危重病人十分不利。 本实验通过建立同种大白兔颈动脉移植模型,分别从病理形态学和体液水平(血浆)、酶学活性及mRNA表达等方面对移植后血管一氧化氮合酶活性变化及其在免疫排斥反应中的意义进行探讨,旨在对同种血管移植前采取的抗生素处理常温密闭保存和抗生素处理后液氮冷冻保存等方法进行比较,以便找到既能保证移植后血管长期畅通、功能基本完整,又能在临床工作中简便实用、迅捷有效的血管处理和保存方法,为在近期建立人类同种血管库积累经验并提供理论基础和可靠依据。 材料和方法 1.动物分组:随机选取健康雄性纯种大白兔。5只新西兰大白兔作为血管供者(G组),体重2.8 kg-3.2 kg(3.02±0.21 kg);30只日本大白兔作为血管受者,体重1.65 kg-2.5 kg(1.89±0.19 kg),随机分为A组(自体移植组,即空白对照组,3只)、B组(新鲜血管植人组,9只)、C组(抗生素处理常温保存组,9只)和D组(抗生素处理液氮保存组,9只)。其中,B组、C组、D组动物依照术后宰杀取材时问随机分成三个亚组(每组3只),分别为1周亚组(<7天)、2周亚组(12-15天)、3周亚组(>15天)。对意外死亡动物及时补足以达到实验设计要求的数量。 2.主要实验器械设备及试剂:显微外科手术放大镜(Keeler 2.5倍)、SSW-3型显微外科手术器械、深低温冷冻冰箱(-86C FORMA-725)、Citadel 2000型脱水机/Thermo全自动切片机(SHANDON Co.)、低温高速离心机(HERMLE Z383K Co.)、PTC-100PCR扩增仪、KODAK ID型凝胶成像系