山羊和绵羊超数排卵及规模化胚胎移植技术研究

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提高山、绵羊体内胚胎生产的效率及胚胎移植后母羊妊娠率和胚胎成活率,对促进优良品种扩繁及良种推广具有重要意义。本研究以国内引进的优良肉羊品种波尔山羊、无角道塞特绵羊为对象,进行了有关胚胎移植关键技术及相关配套技术的研究。通过研究得到了以下结果:1.采用宁波FSH、中科院FSH和宁波+中科院FSH进行波尔山羊超排,三种优化后的超排方案分别回收总胚胎数为17.82±8.41枚、17.33±8.84枚和17.97±9.88枚,回收可用胚胎数分别为14.97±7.56枚、13.78±6.15枚和14.31±6.63枚。表明国产FSH只要超排方案设计合理,同样可以得到好的母羊超排反应和理想的胚胎产量。2.波尔山羊重复超排4次,当连续超排间隔为2个月时,第一次、第二次、第三次和第四次的有效反应供体比例分别为93.99%、80.00%、63.64%和50.00%,回收可用胚胎数分别为14.80±6.91枚、14.00±7.01枚,9.09±7.18枚和7.83±6.09枚。当超排时间间隔为1年时,供体母羊重复超排4次,有效供体利用率分别为95.00%、85.00%、81.25%和70.83%,回收可用胚胎数各重复超排次数之间差异不显著(P>0.05)。表明连续超排时间间隔为1年比较合理。3.根据波尔山羊母羊第一次超排反应,调整第二次重复超排处理FSH给药方案,可以使第一次超排无效供体70%以上成为有效供体,并且可以获得稳定的超排反应和胚胎产量。4.通过波尔山羊青年母羊体重和回收胚胎(卵)数及可用胚胎数的相关关系研究表明,青年母羊体质量>36kg时,可以回收到较高的总胚胎(卵)数及可用胚胎数。表明,波尔山羊青年母羊体质量和超排效果之间有密切的关系,青年母羊配种前良好的饲养,有利于繁殖潜能的发挥。5.无角道塞特绵羊超排研究结果表明,用加拿大FSH(剂量160-200mg/只)超排效果比较成功,可以回收到12.91±7.80枚胚胎/卵和8.64±7.99枚可用胚胎;经产羊的超排效果优于处女羊(P<0.05);连续超排和手术会降低总胚胎/卵回收数,但是对可用胚胎数无明显影响;用观察自然发情母羊超排,可以回收到较高的总胚胎/卵数(13.83±4.64枚)和可以胚胎数(12.00±5.76枚),显著高于诱导发情母羊和未知发情周期母羊超排后获得的总胚胎/卵数(7.00±4.92枚和5.94±3.38枚)和可用胚胎数(4.22±3.42枚和3.19±2.56枚)(P<0.05);超排处理母羊发情推迟24h获得的总胚胎/卵数和可用胚胎数(0.92±1.51枚和0.42±0.90枚)显著低于正常发情母羊(P<0.01);超排后黄体正常母羊获得的胚胎/卵数和可用胚胎数分别为8.83±5.75枚和6.66±5.41枚,显著高于黄体退化母羊(5.88±5.09枚和3.59±4.30枚)(P<0.01)。研究表明,在胚胎移植中,通过使用加拿大FSH(Fotropin V)再结合选择经产母羊、自然发情母羊进行超排处理,冲胚时选择按时发情母羊及黄体正常母羊,可以收获到理想的总胚胎/卵数和可用胚胎数。6.采用医用几丁糖对波尔山羊供体手术后防止粘连处理,第四次重复超排手术后粘连率为37.5%,极显著低于生理盐水冲洗对照组(100%)和右旋糖酐70+肝素处理组的粘连率(100%)。7.绵羊受体同期发情处理研究表明,在繁殖季节,同一同期处理方案处理不同品种,同期发情率和受体利用率品种间差异不显著(P>0.05)。非繁殖季节同羊和内蒙古细毛羊作受体处理后,同期发情率和受体利用率较低,选用小尾寒羊作受体比较理想。在非繁殖季节使用孕酮栓或配合PMSG诱导母羊受体同期发情效果优于PGF2α组和PGF2α+PMSG组。8.通过不同处理方法在不同季节同期发情处理山羊受体,结果表明,栓+PGF2α方法不论在繁殖季节还是在非繁殖季节,为比较理想的同期发情处理方法。在栓+PG2α用于同期发情处理时,配合使用FSH或PMSG,可以增加受体的有效黄体数量,但是对于胚胎移植后母羊的妊娠率及胚胎成羔率无影响。配合使用FSH或PMSG后,均可以缩短处理母羊撤栓到发情之间的时间,对母羊发情持续时间无影响。表明在春季使用20IU-30IU的FSH配合孕酮栓+PGF2α法,有利于受体利用率的提高。PMSG使用剂量以300IU为宜。9.改进国产麻醉剂速眠新肌肉注射为静脉麻醉绵羊受体或山羊受体,用药量大幅度减少。麻醉羊进入麻醉期时间短,麻醉效果确实,手术后母羊苏醒快,苏醒后0.5h可以恢复采食和反刍,苏醒后的2h可以完全恢复正常。表明采用速眠新麻醉剂进行静脉麻醉,用药量少,安全有效。10.通过供体运输、胚胎运输和受体运输进行异地鲜胚移植,主要研究结果,波尔山羊供体母羊在4h以内运输到采卵地点,对供体母羊的胚胎回收数量、胚胎移植后成活率及受体母羊妊娠率均无影响。胚胎在36.5℃运输2 h,对胚胎移植后成活率及受体母羊妊娠率无影响。但是运输温度为20℃时,胚胎移植后成活率下降到41.7%,受体母羊妊娠率下降到42.0%。受体运输后进行鲜胚移植,受体母羊的妊娠率下降到42.0%,胚胎成活率只有32.1%,明显低于供体运输和胚胎运输进行鲜胚移植。表明供体运输为不同畜牧场异地鲜胚移植的最好方法,新鲜胚胎保存在36.5℃短途运输或较长距离运输也可以得到比较理想的胚胎移植妊娠率和胚胎成羔率。11.通过调查和研究,总结的山、绵羊MOET规模化、商业化生产运行模式适合我国国情。本研究建立的山、绵羊胚胎移植效益评估模型和实例效益评估验证表明,该模型可以用于胚胎移植项目立项、项目实施效果评估等研究中。本论文开展的系列研究,对于完善山、绵羊胚胎移植技术体系建设,促进良种山、绵羊品种的快速扩繁和推广,具有重要的理论和实践指导意义。
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