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目的：检测AP-2β基因在结直肠癌SW620细胞中的表达情况；构建AP-2βsiRNA干扰载体,瞬时转染SW620细胞,以实现siRNA表达载体对SW620细胞AP-2β基因的抑制；检测AP-2β干扰载体转染后hTERT表达水平的变化,以期进一步探讨AP-2β基因在肿瘤发生过程中的分子机制并寻找肿瘤基因治疗的新靶点。方法：1.应用RT-PCR和Western Blot Analysis检测转录因子AP-2β在大肠癌细胞中的表达水平；2.构建靶向抑制AP-2β基因的siRNA的真核表达载体；3.通过脂质体介导转染大肠癌细胞,镜下观察转染效率和细胞形态的变化；应用实时荧光定量PCR和Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测siRNA表达载体对AP-2β基因的抑制情况；4.应用RT-PCR检测AP-2β干扰载体转染后hTERT表达水平的变化；5.流式细胞术分析AP-2β干扰载体转染后大肠癌细胞的凋亡变化。研究结果：1.构建靶向抑制AP-2β基因的短发夹双链RNA(shRNA)的真核表达载体AP-2βsiRNA;2.瞬时转染24h后转染效率大约为50%,与阴性对照组相比,干扰组SW620细胞生长受抑,形态发生明显变化。3.针对AP-2β基因的RNA干扰真核表达载体转染SW620细胞后可以抑制AP-2βmRNA及蛋白质的表达。转染AP-2βsiRNA组AP-2βmRNA的相对表达量在24h、48h、72h分别为0.672±0.043、0.501±0.058、0.677±0.077,抑制率分别约为25.66%、44.64%、21.46%；AP-2β蛋白抑制率在48h约为62.05%；统计分析表明,组间差异有统计学意义(P<0.05)。提示转染AP-2β干扰质粒可以有效地抑制SW620细胞中AP-2β的表达。4.实时荧光定量PCR结果表明转染AP-2βsiRNA质粒后,SW620细胞中hTERT mRNA表达水平显著下调。5.流式细胞仪分析显示转染AP-2βsiRNA表达质粒后SW620细胞凋亡增加。结论：成功构建的AP-2βsiRNA干扰载体对SW620细胞中AP-2βmRNA和蛋白表达具有显著抑制效果,AP-2β基因沉默可促进SW620细胞凋亡增加。其作用机制可能与通过作用于hTERT基因从而增强端粒酶活性有关。这些结果为后续进一步研究AP-2β基因在结直肠癌发病机制中的作用奠定了前期实验基础。