【摘 要】
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胸膜肺炎放线杆菌(APP)引起仔猪传染性胸膜肺炎,IFN-γ在胸膜肺炎病猪组织中显著升高,为了解IFN-γ在APP感染中的作用,本研究从中性粒细胞和炎性细胞因子方面探讨了IFN-γ-/-
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胸膜肺炎放线杆菌(APP)引起仔猪传染性胸膜肺炎,IFN-γ在胸膜肺炎病猪组织中显著升高,为了解IFN-γ在APP感染中的作用,本研究从中性粒细胞和炎性细胞因子方面探讨了IFN-γ-/-鼠抗APP的感染机制。IFN-γ-/-鼠与野生鼠感染APP,比较感染后6 h、12 h和24 h临床评分、肺脏菌载量;荧光定量PCR、ELISA检测肺组织中炎性细胞因子和中性粒细胞趋化因子的表达,用流式细胞术检测肺脏中性粒细胞的分型以及存活情况。结果显示,感染APP后IFN-γ-/-鼠与野生型鼠相比存活率明显升高。进一步研究发现,与野生型小鼠相比,IFN-γ-/-鼠肺脏的细菌清除能力显著增强(p<0.01),同时肺脏充血水肿明显减轻;肺组织炎性细胞因子IL-18,IL-1β,TNF-α等及中性粒细胞趋化因子如CXCL1,CXCL2,CXCL5等,于感染后6 h表达上升(p<0.01)并于感染后12 h表达下降(p<0.01)。未感染时IFN-γ-/-鼠肺脏中性粒细胞极显著高于对野生型小鼠,感染后12 h,趋化明显降低(p<0.01),但中性粒细胞坏死及凋亡无明显变化(p>0.05);进一步分型分析,IFN-γ-/-鼠未感染时肺部PMN-Ⅰ明显升高,感染后PMN-Ⅰ(CD49+CD11b-)早期缓慢下降,后期显著升高;PMN-Ⅱ(CD49-CD11b+)则在感染后显著降低(p<0.01)。腹腔注射IL-18后,小鼠肺脏的菌载量显著降低(p<0.05),临床症状以及肺脏病变也明显减轻,小鼠肺中PMN-Ⅰ的蓄积显著增多(p<0.05);IL-18处理后对中性粒细胞吞噬功能以及脱颗粒无明显影响,但是会促进中性粒细胞胞外诱捕网的释放和炎性细胞因子的表达。综上结果证实,IFN-γ缺失可以促进肺组织IL-18分泌,增强PMN-Ⅰ趋化,抑制PMN-Ⅱ极化,诱导早期急性炎症应答,增强中性粒细胞杀菌功能,提高APP感染小鼠存活率。本研究为临床细菌性肺炎的病程监测和阶段性、精细化治疗方案的制定提供了基础,提示IFN-γ可能是调控肺组织炎症应答的一个作用靶点。
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