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为了解决食品安全问题及改善非法添加物在我国明令禁止而屡禁不止的现象。利用噬菌体展示技术构建库容量大、适应性强、稳定性高的多样化重组抗体资源库,旨在筛选出特异性强、亲和力高的食品安全危害物重组抗体以应对突发食品安全事件,为建立快速高效的检测方法奠定基础。本研究选取β-兴奋剂类药物中的西马特罗（Cimaterol,CIM）进行研究。采用聚合酶链式反应技术（PCR）和逆转录PCR（RT-PCR）技术,从未经免疫的健康BALB/c小鼠脾脏中提取RNA,以经RT-PCR获得的鼠源c DNA第一链为模板,设计引物扩增鼠源抗体重链（VH）和轻链（VL）可变区基因,利用重叠延伸PCR（SOE-PCR）扩增鼠源单链抗体（Sc Fv）基因。通过DNA连接、电转等技术构建重组噬菌粒,经辅助噬菌体M13K07救援后,构建天然鼠源噬菌体Sc Fv文库。基因测序分析抗体基因的多样性和完整性。应用重氮化法制备人工免疫抗原CIM-BSA和检测抗原CIM-OVA,并用UV、SDS-PAGE、质谱三种方法进行完全抗原的鉴定。进而以人工完全抗原为靶抗原,对构建的鼠源噬菌体Sc Fv文库进行亲和淘选,使携带抗西马特罗表面抗原的特异性噬菌体抗体得到富集。最终筛选出与西马特罗抗原结合活性较高的噬菌体单克隆。将携带高灵敏高特异性Anti-CIM-Sc Fv基因的噬菌体克隆大量制备,侵染大肠杆菌HB2151后,探索用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG）的最佳表达条件,并用SDS-PAGE和Western blot鉴定。收集分泌至周质腔的表达产物,用酶联免疫吸附检测法（ELISA）鉴定其对CIM的结合活性,间接竞争ELISA法分析其特性。结果显示,Sc Fv片段经凝胶电泳鉴定大小约为780bp,符合鼠源抗体基因特征。辅助噬菌体M13K07再感染后,获得鼠源噬菌体Sc Fv抗体文库,其插入率为89.47%,多样性为91.17%,库容为1.56×1010pfu,经测序鉴定和序列分析,制备的Sc Fv噬菌体展示库丰富度良好且库容符合特异性淘选要求。CIM完全抗原经SDS-PAGE鉴定相对于载体蛋白泳动速度滞后,经UV扫描鉴定相对于载体蛋白出现新的特异吸收峰,质谱测定其相对分子质量,计算得出CIM-BSA及CIM-OVA偶联比分别为8:1及10:1。随着对CIM抗体的亲和淘选的次数增加,其噬菌体回收率也不断增加,第四轮回收率达到4.2×10-3%,最终获得一株高灵敏高特异性的抗CIM噬菌体克隆,经鉴定在淘选过程中未出现基因缺失及突变的现象。抗西马特罗特异性Sc Fv在大肠杆菌中获得了可溶性表达,在IPTG的诱导下其最佳表达条件为0.1 mmol/L IPTG、30℃、16 h,该抗体效价为1:320;用此单链抗体表达产物建立间接竞争ELISA（ic-ELISA）检测方法,标准曲线为y=-0.2752x+1.0753,R2=0.9848,检测范围广,拟合程度良好。该抗体对CIM有良好的灵敏度,其半数抑制浓度(IC50)为101 ng/m L,最低检测限（LOD）为3.16ng/m L。综上所述,成功构建了天然鼠源单链抗体库,成功从该抗体库中筛选出了抗CIM单链抗体,该抗体具有良好的灵敏度,丰富了西马特罗等β2型受体激动剂的残留检测方法,为进一步制备西马特罗的抗体和抗体进化奠定物质基础,为西马特罗等非法添加物的控制使用提供参考。