针刺对SAMP8小鼠海马神经元NMDA受体表达的影响研究

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目的:通过观察针刺对SAMP8小鼠海马神经元突触可塑性及NR2A、NR2B表达的影响,研究针刺对NMDA受体的影响,从NMDA受体角度探讨针刺促突触可塑性发挥、改善学习记忆、治疗AD的调控机制,为针灸促神经康复的可塑性机制提供新的实验依据。方法:以雄性9月龄快速老化模型小鼠(SAMP8)作为AD动物模型,利用Morris水迷宫实验筛选出学习记忆能力下降的SAMP8小鼠,并将其随机分为P8针刺组和P8对照组;抗快速老化模型小鼠(SAMR1)作为R1对照组。其中P8针刺组被予以针刺“百会”、“涌泉”,每日一次,7日一疗程,疗程间隔2天,共4疗程。相应方法取材后,用透射电镜结合体视学测量方法观测小鼠CA1区海马神经元突触界面曲率、突触间隙宽度、突触后致密物(PSD)厚度等突触界面超徽结构参数。用Western Blot蛋白质免疫印迹法结合图像分析方法检测小鼠海马神经元NR2A、NR2B的蛋白表达及NR2A/NR2B比值变化。结果:1.学习记忆能力基线分析结果:P8针刺组和P8对照组小鼠定位航行实验平均逃避潜伏期较R1对照组延长(P<0.05)、游泳总路程较R1对照组增加(P<0.05);空间探索实验目标象限游泳时间百分比较R1对照组减低(P<0.05)、穿越平台次数较R1对照组减少(P<0.05)。P8针刺组与P8对照组之间各参数未见差异(P>0.05)。2.透射电镜检测结果:针剌治疗结束后,P8对照组小鼠CA1区海马神经元突触界面曲率较R1对照组下降(P<0.05)、突触间隙较R1对照组增宽(P<0.05)、PSD厚度较R1对照组变薄(P<0.05)。P8针刺组小鼠CA1区海马神经元突触界面曲率较P8对照组增大(P<0.05)、突触间隙较P8对照组变窄(P<0.05)、PSD厚度较P8对照组增厚(P<0.05)。3. Western Blot检测结果:针刺治疗结束后,与R1对照组比较,P8对照组小鼠海马神经元NR2A相对表达含量呈增高趋势(P>0.05), NR2B相对表达含量呈降低趋势(P>0.05), NR2A/NR2B比值呈增高趋势(P>0.05);与P8对照组比较,P8针刺组小鼠海马神经元NR2A相对表达含量呈下降趋势(P>0.05),NR2B相对表达含量呈上升趋势(P>0.05),NR2A/NR2B比值呈下降趋势(P>0.05)。结论:针刺促进突触可塑性的发挥可能与海马神经元NMDA受体的表达有关,有待进一步研究。
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