银耳多糖的制备、化学结构及活性研究

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目的:本实验通过分离,纯化制备银耳中具有生物活性的多糖部位,并对该活性多糖进行了理化性质和化学结构的分析研究,同时对TP-1样品的匀一性进行了研究。方法:采用酸水解法将银耳子实体制备成银耳多糖、寡糖成分,并通过苯酚-硫酸法、间羟基联苯法及BCA法对银耳多糖的中性糖、酸性糖及蛋白质等理化性质进行研究分析,采用PMP衍生化法制备了单糖的衍生物,并用HPLC法确定其单糖组成。采用甲基化方法分析了解其糖苷键的连接方式,并通过凝胶柱层析和键合相层析等方法对TP-1样品进行了多糖匀一性研究。结果:银耳多糖样品中含有大量的中性糖和酸性糖,其中还含有较少量的蛋白质,银耳多糖主要是由甘露糖组成,还含有少量的葡萄糖,葡萄糖醛酸及木糖,其结构主要由(1→3)连接的Man主链组成,主链Man上的分支点在其2位,连接着以1→6连接4位分支的甘露糖侧链。其还原末端是由Xyl、Glu和Man构成。TP-1样品具有较好的匀一性。通过药理学实验我们发现TP-1样品对于HK-2细胞具有明显的增殖活性。结论:通过对银耳的酸水解、分离,得到收率高、纯度高的银耳多糖,为其今后的开发应用奠定了一定的基础;并通过分析了解了银耳多糖的理化性质及化学结构,通过药理学实验发现该部分银耳多糖对于HK-2细胞增殖具有明显的促进作用,而且该部分样品具有较好的匀一性。
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