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目的通过建立大鼠脊髓损伤模型,探讨蜘蛛香环烯醚萜类对脊髓损伤是否具有抗氧化的保护作用,并研究其对Nrf2/ARE信号通路相关氧化基因的调控作用;此外,选用H2O2诱导PC12细胞氧化损伤模型,从体外进一步探讨蜘蛛香环烯醚萜类激活Nrf2/ARE信号通路对氧化损伤PC12细胞的保护作用机制。方法1.将60只SPF级成年雄性SD大鼠随机分成三组（每组20只）:假手术、模型组、10 mg/kg蜘蛛香环烯醚萜类治疗组（治疗组）。选用医用迷你型脑动脉瘤夹（标定力70 g,钳夹10 s）制备大鼠脊髓损伤模型,假手术组只进行椎板切除而不夹伤脊髓,其余组都进行钳夹脊髓损伤。造模成功2 h后,治疗组灌胃10 mg/kg蜘蛛香环烯醚萜类（IRFV）溶液,模型组和假手术组灌胃等体积羧甲基纤维素钠（CMC-Na）溶液,1次/d。3 d后处死大鼠,苏木精-伊红（HE）染色观察脊髓组织病理改变;末端脱氧核苷酸转移酶激活的dUTP缺口末端标记测定法（TUNEL法）观察神经细胞凋亡情况;用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中氧化应激因子超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量;相关生化试剂盒检测脊髓组织中抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）活力;Western blot法检测脊髓组织细胞核转录因子E2相关因子2（Nrf2）及其下游调控因子血红素加氧酶1（HO-1）、NAD（P）H醌氧化还原酶1（NQO1）、谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基（GCLC）和谷氨酸半胱氨酸连接酶修饰亚基（GCLM）蛋白的表达。2.从体外细胞层面进一步探讨IRFV激活Nrf2/ARE通路减轻氧化损伤PC12细胞的神经保护作用。通过采用不同浓度的过氧化氢（H2O2）（100、200、300、400、500、600、700）μmol/L诱导PC12细胞氧化损伤模型,选用MTT法检测不同浓度H2O2对PC12细胞存活率的影响,确定其最适损伤浓度;将细胞分为四组:正常对照组、H2O2氧化损伤组（模型组）、IRFV+H2O2组（IRFV组）、阳性对照药物维生素C+H2O2组（VC组）。MTT法评估IRFV对氧化损伤PC12细胞的保护作用;倒置显微镜观察细胞形态改变;LDH测定细胞漏出率;Annexin V FITC/PI双染检测细胞凋亡;采用荧光素DCFH-DA探针法测定细胞内活性氧（ROS）水平;相关试剂盒检测MDA含量以及抗氧化酶SOD、GSH-Px和CAT活力;Western blot法检测细胞核Nrf2及其下游调控因子HO-1、NQO1、GCLC和GCLM蛋白的表达。从而进一步揭示IRFV对神经细胞的保护作用机制,为IRFV治疗脊髓损伤提供实验依据及理论基础。结果1.（1）HE染色结果显示:与假手术组相比,模型组大鼠的脊髓组织中观察到脊髓结构严重受损,治疗组有防止神经元形态改变的保护作用,且组织病理学评分显著低于模型组（P<0.05）;（2）TUNEL法检测结果显示:假手术组未看到明显的棕黄色的凋亡神经细胞,而模型组中观察到明显的棕黄色的凋亡神经细胞,与模型组相比,治疗组凋亡神经细胞数明显减少,且具有统计学意义（P<0.05）;（3）ELISA检测结果显示:与假手术组相比,模型组SOD含量降低和MDA含量增加;与模型组相比,治疗组SOD含量增加（P<0.05）,MDA含量显著降低（P<0.01）;（4）脊髓损伤后抗氧化酶GSH-Px和CAT活力明显下降;与模型组相比,治疗组GSH-Px（P<0.05）和CAT抗氧化酶活力（P<0.01）显著提高;（5）Western blot检测结果显示:与假手术组相比,模型组NQO1高于假手术组（P<0.05）,其它蛋白表达无明显差异;与模型组相比,治疗组中的核Nrf2、NQO1、GCLC和GCLM蛋白的表达水平显著增高（P<0.05）,HO-1蛋白表达有一定增加,但无统计学意义（P>0.05）。2.（1）与正常对照组相比,加入500μmol/L H2O2氧化损伤2 h后细胞存活率显著降低（P<0.01）,提示造模成功;且80μg/mL IRFV为最佳干预浓度;（2）与正常对照组相比,H2O2氧化损伤显著降低细胞活力（P<0.01）,通过IRFV干预后,细胞活力显著增加（P<0.05）;（3）与正常对照组细胞相比,H2O2氧化损伤导致细胞突触变短或伪足消失,部分细胞皱缩、脱落,细胞数量减少,通过IRFV干预后,细胞伪足重新伸出,细胞的生长状态明显好转;（4）与正常对照组相比,H2O2氧化损伤导致PC12细胞上清液中LDH漏出量、细胞凋亡率增多（P<0.01）,通过IRFV干预后,LDH漏出量和细胞凋亡率明显下降（P<0.01）;（5）与正常对照组相比,H2O2氧化损伤增加了PC12细胞中ROS和MDA表达水平,IRFV干预可逆转其作用（P<0.05）;（6）与正常对照组相比,H2O2氧化损伤降低PC12细胞抗氧化酶SOD、GSH-Px和CAT活力（P<0.01）,IRFV干预后抗氧化酶活力均显著提高（P<0.05）;（7）与正常对照组相比,H2O2氧化损伤后细胞核Nrf2、HO-1、NQO1,GCLC和GCLM蛋白的表达水平无明显差别;与模型组相比,通过IRFV干预后,Nrf2、HO-1、NQO1、GCLC和GCLM蛋白的表达水平显著增高（P<0.05）。结论（1）IRFV能改善脊髓损伤模型大鼠的脊髓组织病理损害和降低神经细胞凋亡;以及促进H2O2氧化损伤的PC12细胞增殖、降低细胞LDH漏出量和凋亡率、改善氧化损伤诱导的细胞形态改变,保护细胞膜结构完整,从而发挥神经保护作用。（2）IRFV可以通过降低脊髓损伤模型大鼠和H2O2氧化损伤的PC12细胞脂质过氧化产物MDA以及提高抗氧化蛋白酶CAT、SOD和GSH-Px活力来对抗氧化应激损伤。（3）IRFV可以通过上调脊髓损伤模型大鼠和H2O2氧化损伤的PC12细胞核内的Nrf2及下游抗氧化蛋白酶（NQO1,GCLC和GCLM）逆转氧化应激损伤,从而发挥抗氧化的保护作用。