北柴胡3个UGT基因表达特性及其原核表达与蛋白纯化

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目的:分析北柴胡3个UGT基因的MeJA诱导表达特性和组织表达,原核表达并纯化出UGT蛋白,为进行体外催化反应分析UGT基因功能奠定基础。方法:提取MeJA处理不定根和未处理对照不定根的RNA以及北柴胡根、茎、叶、花和果实中的RNA,以柴胡皂苷合成途径关键酶β-AS基因为参照,qRT-PCR分析BcUGT1、BcUGT3和BcUGT6的MeJA诱导表达和组织表达变化。设计含有酶切位点的PCR引物,PCR扩增BcUGT1、BcUGT3和BcUGT6的ORF,酶切后,分别插入到pET-28a(+
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