溶液中单个量子点的示踪研究

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单分子示踪能获取单个分子或粒子的运动轨迹,实时监控生物分子之间的相互作用和信号传递过程。量子点高量子产率、连续的宽的激发光谱、窄而对称的发射光谱、量子尺寸效应等优势使其成为分子生物学、生物医学工程中一种有力的工具。但是,它的眨眼现象却影响着单分子示踪结果的真实性。微流控芯片其高度平行化、集成化、自动化、微型化的特点已广泛应用到基因诊断、蛋白质分析、细胞分析等领域。本文主要研究了溶液中单个量子点的示踪,并初步探索了基于微流控芯片的单分子成像。具体工作内容包括:1、利用通用型的荧光显微镜,研究了单个量子点在载玻片和脱水琼脂糖表面光学性质的差异性。与吸附在载玻片上的量子点相比,观察到吸附在脱水琼脂糖表面的量子点荧光强度增强了。在4%和8%脱水琼脂糖表面量子点的荧光强度分别是载玻片上的2-3倍。单分子成像也揭示了吸附在脱水琼脂糖基底上量子点的眨眼被抑制了。2、选用不同浓度的琼脂糖修饰载玻片来调控粒子的扩散系数,完成了对自由溶液中单个量子点的示踪。12 nm量子点的平均扩散系数在5%和8%脱水琼脂糖修饰的表面比本体溶液中量子点的理论扩散系数小11.6和118.7倍。显微镜电感耦合器件CCD前面安装一个透射光栅,我们还成功地追踪到了脱水琼脂糖修饰的表面与盖玻片之间溶液中的单个动态量子点的光谱。这对探究生物分子之间的相互作用有远大的前景。3、本文采用环氧亲水聚合物共价吸附的方法对PDMS芯片表面进行了修饰,在30 min内可以完成表面修饰过程。这种修饰方法的稳定性可以保持一个月左右。微通道较大程度地保持着亲水性和抗蛋白吸附性。最后用玻璃微流控芯片对脂质体包裹与未包裹的量子点进行了单分子成像,并观察了二者与λ-DNA的反应。
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