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本课题组前期研究发现,环氧酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布可加重动脉粥样硬化（AS）病变,机制可能与上调白三烯（LTs）水平有关。本研究采用载脂蛋白E基因缺陷(ApoE-/-)小鼠配合高脂饮食造成的动脉粥样硬化病变动物模型,从COX-2和5-脂氧酶（5-LO）炎症代谢途径研究COX-2选择性抑制剂塞来昔布上调白三烯（LTs）的机制,并采用5-LO抑制剂齐留通进行干预,以进一步研究白三烯上调在塞来昔布加重AS中的作用,为COX-2抑制剂在AS中的合理使用及COX-2抑制剂导致的AS相关性心血管不良反应的防治及预测提供新理论和新思路。第一部分:塞来昔布在动脉粥样硬化中上调白三烯的机制目的:采用ApoE-/-小鼠配合高脂饮食造成的动脉粥样硬化（AS）病变动物模型,从COX-2和5-LO炎症代谢途径研究COX-2选择性抑制剂塞来昔布在动脉粥样硬化中上调LTs的机制。方法:12只野生型C57BL/6J雄性小鼠为正常对照组,24只6周龄的SPF级ApoE-/-雄性小鼠随机分成2组:AS模型组和塞来昔布组,每组12只。动物适应性喂养2周后,正常对照组给予普通饲料喂养,AS模型组和塞来昔布组给予高脂饲料（常规小鼠饲料+0.15%胆固醇+21%脂肪）。18周后,免疫组织化学法测定主动脉根部切片COX-2、5-LO和白三烯C4合成酶（LTC4S）蛋白表达;用Western Blot法测定主动脉匀浆中5-LO代谢途径与COX代谢通路中LTs合成的关键酶COX-1、COX-2、5-LO和LTC4S蛋白表达水平;用qRT-PCR法测定主动脉匀浆中COX-1、COX-2、5-LO和LTC4S基因表达水平。结果:免疫组化结果显示:COX-2在正常对照组少量表达,COX-2表达在细胞核中,也见于胞浆中。AS组和塞来昔布组COX-2表达明显增加（与正常对照组比较,P<0.01）。塞来昔布组COX-2阳性表达较AS模型组明显减少（P<0.01）。5-LO在正常对照组少量表达,主要表达在核膜中。AS组和塞来昔布组5-LO表达明显增加（与正常对照组比较,P<0.01）。塞来昔布组5-LO阳性表达比AS模型组明显增加（P<0.01）。LTC4S在正常对照组未见表达。在AS组和塞来昔布组LTC4S表达（与正常对照组比较,P<0.01）,LTC4S表达主要在胞浆中。塞来昔布组LTC4S阳性表达较AS组明显增加（P<0.01）。Western Blot结果显示:正常对照组、AS模型组和塞来昔布组COX-1蛋白表达无明显差别。与正常对照组比较,AS模型组小鼠主动脉匀浆中COX-2、5-LO和LTC4S的蛋白表达明显升高（P<0.01）。塞来昔布组小鼠主动脉中COX-2蛋白表达较AS模型组明显降低（P<0.01）,5-LO、LTC4S蛋白的表达则较AS模型组明显升高（P<0.01）。PCR结果表明:AS模型组和塞来昔布组主动脉匀浆COX-1基因表达无差别。与AS模型组比较,塞来昔布组小鼠主动脉匀浆中COX-2基因表达明显降低（P<0.01）,5-LO和LTC4S基因表达则明显升高（P<0.01）。结论:80mg/kg/d塞来昔布灌胃18周在降低ApoE-/-小鼠主动脉COX-2蛋白和基因表达的同时,可提高5-LO和LTC4S蛋白和基因表达,提示塞来昔布可能通过5-LO分流机制上调主动脉LTs水平。第二部分齐留通在动脉粥样硬化中对塞来昔布的干预作用目的:采用ApoE-/-小鼠配合高脂饮食造成的动脉粥样硬化（AS）病变动物模型,研究5-LO抑制剂齐留通在动脉粥样硬化中对塞来昔布的干预作用。方法:12只野生型C57BL/6J雄性小鼠为正常对照组,36只6周龄的SPF级ApoE-/-雄性小鼠随机分成3组,分别为AS模型组、塞来昔布组和塞来昔布+齐留通组,每组12只。动物适应性喂养2周后,正常对照组给予普通饲料喂养,AS模型组、塞来昔布组和塞来昔布+齐留通组给予高脂饲料（常规小鼠饲料+0.15%胆固醇+21%脂肪）。18周后,行B超探查观察小鼠主动脉AS斑块形成情况,测量主动脉弓斑块面积比（%）和腹主动脉内径;取主动脉全长,体视显微镜下拍照观察主动脉斑块形成情况;之后行小鼠主动脉全长作油红O染色,观察主动脉斑块的病变情况并测定主动脉斑块阳性面积比（%）。主动脉根部切片HE染观察AS病变并测定主动脉根部斑块面积比（%）和内中膜厚度（IMT）。结果:小鼠主动脉B超探查、体视显微镜下主动脉全长拍照、主动脉全长油红O染色以及主动脉根部HE染色观察主动脉AS病变,均显示AS模型组主动脉形成了明显的AS斑块;塞来昔布组AS病变范围和程度均较AS组明显加重;塞来昔布+齐留通组AS病变范围和程度均较塞来昔布组明显减轻。B超测量结果中,与正常对照组比较,AS模型组主动脉弓段斑块面积明显增加（P<0.01）。塞来昔布组主动脉弓段斑块面积较AS组明显增加（P<0.01）;塞来昔布+齐留通组主动脉弓段斑块面积较塞来昔布组明显减小（P<0.01）,而与AS模型组无明显差异（P>0.05）。AS模型组腹主动脉血管内径比正常对照组明显减少（P<0.01）;塞来昔布组腹主动脉管腔极度狭窄,和AS模型组相比,血管内径明显减小（P<0.01）;塞来昔布+齐留通组腹主动脉血管内径与塞来昔布组相比明显增大（P<0.01）。主动脉全长油红O染色斑块面积比（%）测量结果显示,和正常对照组相比,AS组斑块面积明显增加（P<0.01）,说明造模成功。和AS组相比,塞来昔布组斑块面积明显增加（P<0.01）。塞来昔布+齐留通组斑块面积较塞来昔布组明显减少（P<0.01）,而与AS模型组无明显差异（P>0.05）。主动脉根部HE染色中斑块面积比（%）测量结果显示,与正常对照组相比,AS模型组斑块面积明显增加（P<0.01）;与AS模型组相比,塞来昔布组斑块面积较明显增加（P<0.05）;塞来昔布+齐留通组主动脉斑块面积较塞来昔布组明显减小（P<0.05）,而与AS模型组无明显差别（P>0.05）。IMT统计结果显示,和正常对照组相比,AS模型组IMT明显增加（P<0.01）;和AS模型组相比,塞来昔布组IMT明显增加（P<0.01）;塞来昔布+齐留通组IMT值较塞来昔布组明显减小（P<0.01）,而与AS模型组无明显差别（P>0.05）。结论:塞来昔布80mg/kg/d灌胃18周可加重ApoE-/-小鼠AS病变,5-LO抑制剂齐留通同步灌胃干预可减轻塞来昔布对AS的加重作用。