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目的:研究辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对多发性骨髓瘤细胞株U266细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能机制。
方法:采用台盼蓝拒染法、四氮唑蓝(MTT)比色法检测SAHA对U266细胞增殖的影响;Hoechst33342染色检测凋亡细胞的形态;AnnexinV和PI染色后应用流式细胞仪检测SAHA作用U266细胞的凋亡率;Western-blot方法检测组蛋白H3乙酰化水平、细胞周期依赖性蛋白激酶抑制剂p21蛋白表达水平以及p38MAPK信号通路相关蛋白表达水平。
结果:台盼蓝拒染法和四氮唑蓝(MTT)比色法均显示,SAHA可明显抑制U266细胞增殖,且具有时间剂量依赖性;Hoechst33342染色在荧光显微镜下可见SAHA处理组细胞胞核出现明显的核固缩、核碎裂的情况,出现较多量的凋亡细胞;利用AnnexinV/PI双标法经流式细胞仪检测不同浓度的SAHA(0.5、1、2、4umol/L)作用U266细胞凋亡率24h分别为(2.83±0.87)％、(10.00±0.87)％、(18.97±1.19)％和(31.47±1.66)％,48h分别为(10.37±0.65)％、(24.33±2.11)％、(30.37±2.97)％和(57.7±2.45)％,呈时间剂量依赖性。Western-blot结果显示U266细胞经SAHA处理后,U266细胞组蛋白H3乙酰化水平及p21蛋白表达水平升高,呈现时间剂量依赖性。p38MAPK通路相关蛋白表达水平无明显改变。
结论:SAHA抑制多发性骨髓瘤细胞株U266细胞增殖并诱导凋亡,SAHA可以促进组蛋白H3乙酰化水平升高,并且促进p21蛋白表达增加。SAHA对U266细胞p38MAPK信号通路不产生影响。