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火麻仁(hempseed)是桑科植物大麻.Cannnbis sativa L.的干燥成熟果实。研究表明,火麻仁提取物具有抗氧化、抗衰老、抗炎、神经保护以及改善化学药物致阿尔茨海默病(AD)样模型鼠的学习与记忆能力等药理作用。神经炎症是AD的一个重要病理特征,本课题组前期研究发现,火麻仁木脂素酰胺类化合物可通过抑制NF-κB信号通路来阻止脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞的活化,从而起到抗神经炎症的作用。为了进一步研究火麻仁神经保护药效物质,本文继续对火麻仁的化学成分进行了深入研究,并评价了火麻仁提取物对LPS诱导的神经炎症模型小鼠的保护作用。通过多种柱色谱(大孔吸附树脂、聚酰胺、ODS、sephadexLH-20等)、高速逆流色谱及高效液相色谱制备等方法对火麻仁乙醇提取物进行分离,采用核磁共振、质谱、紫外及红外等方法对所得化合物进行结构鉴定,共分离并鉴定了20个化合物,包括15个苯丙酰胺类(其中1、3-8为木脂素酰胺类):Cannabisin Q(1)、coumaroylaminobutanol glucopyranoside(2)、Cannabisin A(3)、Cannabisin B(4)、Cannabisin M(5)、3,3’-demethyl-grossamide(6)、Cannabisin F(7)、Cannabisin G(8)、N-trans-caffeoyloctopamine(9)、N-trans-coumaroyloctopamine(10)、N-trans-coumaroyltyramine(11)、N-trans-feryroyltyramine(12)、N-trans-caffeoyltyramine(13)、(S)-N-(2-(4-hydroxyphenyl)-2-methoxyethyl)cinnamamide(14)、4-[(E)-p-coumaroylamino]butan-1-ol(15);3 个糖苷类:trans-ferulicacid-4-O-β-D-glucopyranoside(16)、adenosine(17)、sucrose(18);2个单苯环类:p-hydroxybenzaldehyde(19)、4-hydroxy-3-methoxybenzoic acid(20)。其中,化合物1和2为新化合物,化合物9、10、14-18、20为首次从火麻仁中分离得到。鉴于火麻仁苯丙酰胺类成分可能在火麻仁的诸多功效中发挥重要作用,本文还对该类成分进行了富集工艺优化及定性定量研究。以所分离的化合物为对照品,采用液质联用技术及HPLC分析,从火麻仁提取液中识别了 15个已知的苯丙酰胺类化合物,并对尚未分离的化合物进行了初步判断;利用HPLC对6批不同产地火麻仁中的代表性成分Cannabisin A、N-trans-caffeoyltyramine及总苯丙酰胺(TPA)进行了含量测定,其含量范围分别为27.14-145.48 μg/g、23.93-113.13μg/g 及 129.39-641.90 μg/g。采用优化的提取工艺富集火麻仁TPA组分,开展动物实验,检测其在神经保护方面的活性。实验取八周龄雄性昆明小鼠以腹腔注射LPS(250μg/kg/d)法连续造模一周获得神经炎症模型,设TPA高剂量组(2g/kg/d)、TPA低剂量组(1g/kg/d)为给药组,吡拉西坦(0.4g/kg/d)为阳性药对照组。Morris水迷宫结果表明,TPA可以显著性改善LPS诱导的神经炎症模型小鼠的学习和记忆能力;ELISA结果显示,TPA低剂量组可以显著性抑制LPS诱导的模型小鼠脑内炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α的过量表达;HE染色结果显示,TPA可以改善LPS诱导的小鼠海马CA3区神经细胞的损伤,具有保护神经细胞的作用;免疫组化染色结果显示,TPA具有抑制LPS诱导的小鼠海马内iNOS蛋白过量表达的作用。本论文在前期研究基础上进一步揭示了火麻仁抗AD药效物质基础,为火麻仁的开发、利用奠定了理论基础。