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目的:脊髓是人体运动控制的初级中枢,存在复杂的胆碱能神经系统,能直接或间接地参与脊髓的运动控制。烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)在脊髓腹角有广泛分布,对于脊髓运动控制具有重要的调制功能。探讨依托咪酯(etomidate,ET)对脊髓腹角神经元电生理特性及nAChR的影响,这不仅有助于深化理解ET发挥麻醉作用的脊髓机制,也将为指导临床用药提供新的理论依据。方法:选用7?12 d新生Sprague Dawley(SD)大鼠,麻醉后,将其含有腰骶膨大的脊髓游离并切片,用木瓜蛋白酶(Papain,0.18 g/30 ml人工脑脊液)对脊髓切片进行恒温消化20-25 min后孵育40-50 min,在体视显微镜下选出切片的腹角,用经火抛光的不同口径的巴斯德吸管对神经细胞进行急性机械分离,对贴壁的状态良好的神经细胞结合药理学方法实施穿孔膜片钳记录实验。在电流钳模式下,先记录脊髓腹角神经元自发动作电位(Action Potential,AP),然后结合预处理给药方式,分别记录不同浓度的依托咪酯对脊髓腹角神经元自发AP的影响。在电压钳模式下,先应用尼古丁在脊髓腹角神经元诱导出内向电流,然后结合预处理给药方式,记录在不同浓度的依托咪酯、不同钳制电位以及不同使用时间的情况下,依托咪酯对尼古丁在脊髓腹角神经元诱导的内向电流的影响。结果:(1)经急性机械分离的脊髓腹角神经元状态良好,具有形状多样的胞体和完整的突起。(2)共记录到21例脊髓腹角神经元有自发AP,经0.3、3.0、30.0?mol/L(3.0?mol/L相当于临床浓度)不同浓度的依托咪酯预处理2 min后,与给药前比较,12例神经元的AP幅度、锋电位幅度及超射(overshoot,OS)皆被浓度依赖性的压抑(ANOVA,P(27)0.01);自发放电频率显著降低(P(27)0.01)。另外9例神经元的AP被3.0或30.0?mol/L的依托咪酯完全取消。(3)在相同钳制电位下(V_H=-70 mV),分别经0.3、3.0和30.0?mol/L的依托咪酯预处理2 min后,0.4 mmol/L尼古丁诱导的电流幅度被浓度依赖性压抑(P(27)0.01,n=7)。(4)将钳制电位(V_H)分别设定为-30、-50和-70 mV,应用30.0?mol/L的依托咪酯预处理2 min后,0.4 mmol/L尼古丁诱导的电流幅度被电压依赖性的压抑(P(27)0.01,每个钳制电位下n=6)。(5)在30.0?mol/L的依托咪酯预处理6 min过程中,分别于0、2、4、6 min时先后四次暴露于0.4 mmol/L的尼古丁(每次暴露时间为2 s),随着暴露次数增多,尼古丁电流幅度逐渐减小;但若在6 min的预处理过程中,仅在开始(0 min)和结束(6 min)时先后两次暴露于相同浓度的尼古丁,则电流幅度抑制率较四次暴露尼古丁时的抑制率明显降低(P(27)0.01,n=6)。结论:经急性机械分离的脊髓腹角神经元状态良好,适于膜片钳实验研究。依托咪酯以浓度依赖的方式降低脊髓腹角神经元的兴奋性,并且以浓度依赖、电压依赖和使用依赖的方式抑制nAChR介导的电流。