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研究背景多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM),是一种源自浆细胞的恶性增殖性疾病,伴有血清中单克隆免疫球蛋白或轻链(M蛋白)过度生成,导致相关器官或组织损伤。尽管近年来蛋白酶体抑制剂、免疫调节剂等新的靶向治疗不断涌现,使得MM患者的治疗缓解率明显提高,但联合化疗仍是目前针对MM的主要治疗方法。越来越多的相关研究发现,肿瘤细胞可通过启动自噬抵抗化疗药物造成的DNA损伤,是肿瘤细胞耐药和抵抗化疗的重要因素之一。同样,在MM临床治疗中,细胞耐药和对治疗抵抗而导致的疾病复发、进展是临床医生尤其关注的问题。因此,调控自噬在MM细胞中的活性,对于改善MM治疗效果具有重要的临床意义。研究发现,蛋白的乙酰化修饰可有效调控自噬。已知丙戊酸钠(Valproic acid,VPA)是一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi),因此,通过观察VPA对MM细胞自噬的调控作用及其潜在机制,将为临床上进一步寻找MM的有效治疗提供更佳的依据。目的本研究探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂VPA作用于人骨髓瘤细胞系所产生的自噬反应及其与DNA损伤药物阿霉素(Doxorubicin,DOX)及马法兰(Melphalan,MEL)的联合使用效应,观察VPA在人多发性骨髓瘤细胞系中对自噬的作用,以及其是否能在降低DNA损伤药物用药剂量的同时提高抗MM活性及相关机制。方法以人骨髓瘤细胞系RPMI8226、H929为靶细胞;MTT法检测不同浓度VPA、DOX、MEL单药处理的细胞生长抑制率,得出不同抑制率时的用药浓度(IC值);根据所得IC值,检测非毒性抑制剂量VPA(IC5)联合不同剂量(IC10、IC20、IC40)DNA损伤药物作用时细胞生长抑制率;Western blot检测实验组分为:VPA单药组,DOX单药组,MEL单药组,非毒性抑制剂量VPA(IC5)联合DOX(IC10)或MEL(IC10)组。检测单用药及联合用药组处理后细胞内自噬相关蛋白(LC3、ATG5、ATG7)及乙酰化组蛋白H4K16ac水平。结果VPA、DOX、MEL单药组,随着用药浓度的增加,细胞生长抑制率上升。VPA与DOX、MEL共处理后,细胞抑制率较DOX、MEL单药组显著增加(P<0.05);VPA单药处理后胞内LC3水平下降,H4K16ac水平上升;DOX、MEL单药组处理骨髓瘤细胞后,细胞内LC3水平上升,H4K16ac水平下降;联合用药组LC3及H4K16ac蛋白水平介于VPA与DOX或MEL单药处理组之间。结论非抑制剂量VPA能放大DOX与MEL的抗骨髓瘤活性,同时尚能下调自噬相关蛋白表达并上调H4K16ac蛋白水平。基于H4K16ac可抑制自噬相关基因转录,本研究提示VPA放大DNA损伤剂的抗MM活性涉及H4K16ac介导的细胞保护性自噬抑制。VPA能通过抑制细胞自噬,从而打断DNA损伤药物DOX与MEL诱导的自噬性保护作用,增加了DNA损伤药物的抗骨髓瘤活性作用。