【摘 要】
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[目 的]本研究通过对HLA-DRB1*0301转基因大鼠及幽门螺杆菌（HP）感染大鼠进行实验性自身免疫性甲状腺炎（EAT）的制备,通过比较不同EAT模型大鼠的甲状腺特异性自身抗体水平、甲状腺组织形态、甲状腺Fas、FasL蛋白及mRNA的表达水平,来探讨HLA-DRB1*0301基因及HP感染对自身免疫性甲状腺炎（AIT）的影响。[方 法]实验选用4-5周龄的野生型或转基因型SD雌性大鼠,分为对
【基金项目】
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云南省科技厅-昆明医科大学联合专项资金项目（2018FE001-097）；
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[目 的]本研究通过对HLA-DRB1*0301转基因大鼠及幽门螺杆菌（HP）感染大鼠进行实验性自身免疫性甲状腺炎（EAT）的制备,通过比较不同EAT模型大鼠的甲状腺特异性自身抗体水平、甲状腺组织形态、甲状腺Fas、FasL蛋白及mRNA的表达水平,来探讨HLA-DRB1*0301基因及HP感染对自身免疫性甲状腺炎（AIT）的影响。[方 法]实验选用4-5周龄的野生型或转基因型SD雌性大鼠,分为对照组、EAT 组、EAT+HP 组、EAT+转基因组和 EAT+转基因+HP 组。HLA-DRB1*0301转基因大鼠由赛业生物科技有限公司构建,通过HP灌胃建立HP感染模型。大鼠EAT模型的制备采用猪甲状腺球蛋白与弗氏佐剂乳化后皮下注射进行免疫,同时给予高碘水喂养。实验结束后取大鼠血清及甲状腺组织,通过酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清TgAb及TPOAb水平,用苏木素-伊红（HE）对甲状腺组织染色观察其组织形态改变,通过免疫组织化学（IHC）及实时定量PCR（qPCR）法对甲状腺组织中的凋亡相关基因Fas、FasL的蛋白及mRNA水平进行检测。[结 果]1.各模型组大鼠血清TgAb、TPOAb水平明显高于对照组（P<0.01）;与 EAT 组比较,EAT+HP 组 TgAb、TPOAb 水平明显升高（P<0.01）,而EAT+转基因组的TgAb、TPOAb水平与EAT组则无明显差异（P>0.05）;与EAT+转基因组比较,EAT+转基因+HP组的TgAb、TPOAb水平明显升高（P<0.01）;而EAT+HP组与EAT+转基因+HP组的TgAb、TPOAb水平无明显差异（P>0.05）。2.甲状腺组织HE染色可以观察到:对照组甲状腺滤泡大小较均匀,形态较为规整,滤泡腔内充满胶质,甲状腺组织中未见明显炎性细胞浸润;各模型组大鼠甲状腺滤泡大小不等,形态不规则,部分滤泡固缩甚至消失,甲状腺组织中可见炎性细胞浸润,其中,EAT+HP组和EAT+转基因+HP组的甲状腺组织炎性改变更为严重。3.IHC法及qPCR法对甲状腺组织中Fas、FasL蛋白及mRNA表达水平检测结果发现:各模型组甲状腺组织的Fas、FasL蛋白及mRNA表达表达水平均高于对照组（P<0.05）;与EAT组比较,EAT+HP组Fas、FasL蛋白及mRNA表达升高（P<0.05）,而EAT+转基因组与EAT组则无明显差异（P>0.05）;与EAT+转基因组比较,EAT+转基因+HP组的Fas、FasL蛋白及mRNA表达水平升高（P<0.05）;而EAT+HP组与EAT+转基因+HP组无明显差异（P>0.05）。[结 论]1.HP感染可能使AIT的TgAb、TPOAb升高。2.HP感染可能加重AIT的甲状腺组织炎性程度。3.HP感染可能通过Fas、FasL通路参与AIT的疾病进展。4.HLA-DRB1*0301基因不能使AIT的TgAb、TPOAb及甲状腺组织炎性改变加重。
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