门静脉动脉化对大鼠肝脏蛋白质合成代谢的实验研究

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【目的】1、研究完全门静脉动脉化对部分肝切除后的大鼠的存活情况及肝脏功能的影响。2、研究完全门静脉动脉化时,大鼠部分肝切除后血清中前白蛋白、白蛋白等蛋白质及氨基酸谱水平的变化,来探讨门静脉动脉化(PVA)对肝脏蛋白质合成代谢功能的影响,进而为PVA的临床应用提供参考价值。【方法】1、采用袖套法建立动物模型,袖套法为SD大鼠同种异体血管及薄壁聚乙烯管(袖套)制作,手术方法为:乙醚半开放麻醉,腹部正中切口,分离左肾动静脉,切除左肾,同种异体血管材料套入左肾动脉并缝合断端,将连接袖套一端与门静脉近端套入结扎,左肾静脉借助袖套与肠系膜上静脉连接。在此基础上切除大鼠肝脏左外侧叶加乳头叶,约占大鼠肝脏的40%,如此建立动物模型。分组:SD大鼠30只为A组(门静脉动脉化+40%肝切+左肾切除组),20只为B组(40%肝切+左肾切除组)20只为C组(单纯左肾切除组),术后观察生存率、外周血肝功能变化、肝再生功能评估、肝脏病理改变。2、随机选取SD大鼠30只为A组(门静脉动脉化+40%肝切+左肾切除组),20只为B组(40%肝切+左肾切除组)20只为C组(单纯左肾切除组)建立动物模型并记录手术时间、门静脉阻断时间、存活率。于术后1d、3d、5d、7d、10d五个时间点检测血清白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)和总蛋白(TP)含量。术后3d、7d两个时间点,全自动氨基酸分析仪检测血清氨基酸谱水平。【结果】1、大鼠门静脉动脉化联合40%肝脏切除模型的建立1.1门静脉动脉化模型组造模成功率90%(27/30),造模成功的大鼠均存活。术后1周各组大鼠体重变化相互比较,差异无统计学意义(P>0.05);三组大鼠ALP于术后各时间点相互比较,差异均无统计学差异(P>0.05);术后第3天,A组中AST、ALT较B组、C组均降低,差异有统计学意义(P<0.05),而CHE较B组、C组均升高,差异有统计学意义(P<0.05),提示门静脉动脉化对早期肝功能恢复有明显作用。术后1周,A组中ALT较B组、C组均降低,差异有统计学意义(P<0.05),提示门静脉动脉化对肝功能恢复仍有明显促进作用,其余肝功能指标比较均无统计学差异(P>0.05)。术后1月,各组肝功能指标比较均无统计学差异(P>0.05)。1.2术后第3天、1周,A组LRR较B组均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);术后1月,A组LRR较B组升高,差异无统计学意义(P>0.05)。提示门静脉动脉化,有利于肝脏部分切除术后早期肝脏再生。1.3术后1月病理检查示:三组大鼠肝脏均未见明显病理性改变。2、大鼠门静脉动脉化联合40%肝脏切除后对大鼠肝脏蛋白质合成代谢的影响2.1一般情况:A组手术成功率93.3%(28/30),B组和C组手术成功率均100%,A、B、C三组大鼠门静脉阻断时间分别为:(16±2.5)min、15min、15min,平均手术时间分别为:(59±5.5)min、(40±4.5)min、(26±1.5)min。2.2血清蛋白:A、B两组大鼠于术后1、3、5天时,血清前白蛋白(PA)较C组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。A组大鼠于术后第5天血清前白蛋白(PA)较B组明显升高,血清总蛋白较C组明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。A、B、C三组大鼠血清白蛋白(ALB)于各时间点差异无统计学意义(P>0.05)2.3血清氨基酸谱:I:A、B两组大鼠于术后第3d血清中丙氨酸、络氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸较C组明显升高,缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、精氨酸、色氨酸及BCAA/AAA(支/芳)较C组明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05),其中A组中缬氨酸较B组明显降低,亮氨酸和赖氨酸较B组明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05),甘氨酸、组氨酸较C组降低,蛋氨酸较C组稍升高,差异均无统计学意义(P>0.05)II:A组大鼠于术后第7d血清中异亮氨酸、亮氨酸、精氨酸、色氨酸及BCAA/AAA(支/芳)较B组明显升高,络氨酸、苯丙氨酸较B组明显降低,丙氨酸、赖氨酸较C组升高明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。B组大鼠血清中丙氨酸、络氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸较C组明显升高,异亮氨酸、亮氨酸、精氨酸、色氨酸及BCAA/AAA(支/芳)较C组明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05),余氨基酸升高或降低差异相互比较均无统计学意义(P>0.05)。【结论】1、利用同种异体的动脉血管材料行袖套法建立的大鼠门静脉动脉化模型,血管通畅率高,是一个可行、稳定、操作简便、可重复性强的模型。2、门静脉动脉化能促进肝脏的再生,短期内恢复肝功能,并可使实验动物存活。3、门静脉动脉化能增强肝部分切除术后早期肝脏的蛋白合成能力,短期内恢复血浆蛋白质水平。4、门静脉动脉化后可短期内有效提升肝部分切除术后血浆BCAA/AAA比值,恢复血清氨基酸水平,且动脉化组较非动脉化组更能在短期内迅速恢复,对氨基酸代谢调节有增强作用。
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