目的:了解TGF-β家族成员BMP-2/BMP-4是否能够替代TGF-β,或者促进TGF-β体外诱导调节性T细胞（Treg）的能力,及其可能的机制。方法:利用免疫磁珠分选出不同基因型小鼠脾脏的Na?ve CD4+细胞,经过TCR刺激,加入IL-2 （20 U/ml）,按照不同的培养要求加TGF-β（2 ng/ml）, BMP-2 （10 ng/ml）, BMP-4 （10 ng/ml）。在体外诱导3天后收集细胞,用细胞内染色检测Foxp3的变化。部分培养条件中加入Noggin,JNK和ERK的阻断剂。Western Blot检测BMP对Smad1磷酸化的影响。另外,将BMP体内注射,观察外周血,淋巴和脾脏内CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺T细胞占CD4⁺T细胞的比例。分离出脾脏的CD4⁺CD25⁺T细胞通过混合淋巴细胞培养分析其抑制功能。结果:体外TCR刺激的情况下,BMP-2,BMP-4本身并不能够诱导产生Foxp3⁺T细胞。Noggin阻断BMP受体,但并不影响TGF-β体外诱导Treg的能力。BMP-4能够增加TGF-β体外诱导Treg的能力。体内注射BMP不能增加Foxp3⁺细胞的比例,但能够促进TsA增加Foxp3的能力。BMP本身不能够扩增自然Treg,另外BMP联合TGF-β诱导后的T细胞更能抵抗凋亡。BMP-2,BMP-4除了增加Smad1的磷酸化,主要能够增加ERK,JNK磷酸化来促进Foxp3⁺ T细胞的诱导。结论:BMP-2,BMP-4单独并不能够诱导Treg;无论在体内还是体外,BMP都能促进TGF-β诱导Treg的能力;BMP这种能力主要依赖于MAKP的ERK和JN K信号。目的:探讨TGF-β诱导调节性T细胞和Th17生成中TGF-β下游信号机制,了解这两群细胞体外诱导分化中TGF-β作用的不同信号机制。方法:利用Auto MACS来分选出不同基因型小鼠脾脏内的Na?ve CD4⁺T细胞。按照调节性T细胞和Th17细胞不同的诱导条件进行体外诱导。根据实验要求分别加入MAKP, P38,JNK或ERK阻断剂。体内实验通过向小鼠腹腔注射TsA,由FACS分析不同基因型小鼠体内Foxp3⁺T细胞的变化。利用不同基因型小鼠来免疫诱导EAE小鼠模型,分离出脾脏淋巴细胞分析Th17含量的变化,一组EAE模型在免疫诱导后注射P38阻断剂,在相同时间点来分析Th17的含量的变化。结果:在体外实验中,敲除Smad2/Smad3基因后,TGF-β仍然能够诱导出Treg,但是能力稍弱。当加入MAKP,JNK或ERK阻断剂后能够明显削弱TGF-β体外诱导Treg的能力。体内实验中,缺乏Smad3信号时atRA仍然能够促进iTreg的生成和抑制Th17的生成。在EAE模型中,P38抑制剂能明显降低EAE的发病程度。结论: TGF-β信号是体外TGF-β诱导调节性T细胞和Th17细胞生成所必须的信号通路;Smad信号在TGF-β诱导调节性T细胞中只有部分作用;TGF-β的MAKP信号通路在TGF-β诱导调节性T细胞和Th17细胞生成中也起着关键性的作用。TGF-β下游的MAKP中,ERK和JNK信号通路参与了Treg的分化,而JNK和P38参与了Th17的分化。方法:体外分离出人外周血PBMC中的Naive CD4⁺ T细胞,在体外经过anti-CD3CD28-beads的TCR刺激后,伴有IL-2,和/或TGF-β,和/或Rapamycin（RAPA）诱导7天后,检测细胞表面CTLA-4和细胞内FOXP3等的表达。通过混合淋巴细胞培养分析诱导后细胞体外抑制活性。将体外诱导的细胞和PBMC同时注射到免疫缺陷鼠体内观察其对异种移植物抗宿主反应的抑制情况。同时分析人细胞在小鼠组织内的浸润情况。结果:RAPA能够诱导TCR刺激后的Na?ve CD4⁺细胞成为FOXP3⁺T细胞,该功能在加入ALK5阻断剂后消失。RAPA联合TGF-β能够诱导出具有免疫抑制功能的CD4RAPA,该细胞表达膜表面TGF-β,其体外抑制功能在加入ALK5阻断剂后丧失。将PBMC（20×10⁶）注射给RAG2^-/-γc^-/-小鼠会诱发急性异种移植物抗宿主病,同时给予CD4_RAPA则能够明显延长小鼠的存活时间,减少人细胞的组织浸润。结论:RAPA能够增加CD4⁺ T细胞FOXP3的表达,依赖于TGF-β信号;RAPA能够联合TGF-β在体外诱导出类似于nTreg表型的FOXP3⁺ T细胞。这群细胞高表达趋化因子的受体,该细胞本身在TCR刺激时并不在增殖。RAPA联合TGF-β诱导的Treg表达膜表面的TGF-β,其抑制活性依赖于mTGF-β。将RAPA联合TGF-β诱导的Treg输注给RAG2^-/-γc^-/-小鼠,能够明显减轻异种移植物抗宿主反应,延长小鼠的存活。