基于小孢子培养的大白菜优异种质创制

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:sarnimoon
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为创制优异的大白菜DH系应用于大白菜育种实践,以具有黄心、抗根肿病大白菜和黄心、耐抽薹的大白菜材料为亲本配制的13个杂交种F1为试材,采用游离小孢子培养的方法,研究了基因型、植物生长调节剂、细胞器抗氧化剂对大白菜游离小孢子胚发生和胚状体再生成苗的影响,对创制的具有优良特性的DH系进行植物学性状调查、抗根肿病和耐抽薹性的鉴定,结果如下:1.13个大白菜基因型材料中,有8个品种成功诱导出了胚状体,出胚基因型为ZL01、ZL02、ZL03、ZL04、ZL06、ZL08、ZL09、ZL11,出胚基因型率为 61.54%,说明不同基因型的大白菜小孢子胚诱导率有差异显著,基因型对小孢子胚胎发生有重要的影响。2.利用植物生长调节剂—6-benzyladenine(6-BA)和 Naphthy1 Acetic Acid(NAA)对易出胚ZL01、一般出胚的ZL03、难出胚的ZL08这3种试材的小孢子进行诱导成胚,发现它们对小孢子胚胎发生有促进作用,最适宜的浓度组合为’0.1~0.2mg·L-1 6-BA +0.05~O.1mg.L-1 NAA ’。3种材料最高胚状体诱导率分别为5.76胚·蕾-1,5.01胚·蕾-1,4.63 胚·蕾-13.将不同浓度的细胞器抗氧化剂—Methylene Blue(MB,亚甲蓝)加入到ZL01、ZL03、ZL08这3种试材的游离小孢子培养基中,当MB浓度为10nM MB时,胚诱导率和直接成苗率均达到最高,诱导率分别为6.69胚·蕾-1,4.70胚·蕾-1,4.10胚·蕾-1,分别是对照组的1.74、1.58、1.62倍。3种试材的直接成苗率都显著提高,尤其是对ZL08的作用,最高成苗率为47.78%,是对照组的1.98倍,同时死亡率降低了 1.32倍。结果说明适宜浓度的MB对小孢子成胚及成苗有促进作用,高浓度的MB对小孢子成胚及胚状体成苗的抑制作用显著。4.利用流式细胞仪鉴定,出胚的8个大白菜基因型再生植株的平均自然加倍率为57.87%。诱导生根的最适培养基为MS+O.1mg·L-1 NAA。5.经鉴定筛选出13个优异的大白菜DH系,且球心颜色均为黄色;DBC01、DBC02、DBC07、DBC13这4个DH系为对根肿病免疫;其它9个DH系则为高抗根肿病,发病率均小于20%;由抽薹指数和中心柱形状两方面鉴定得出DBC02、DBC03为极耐抽薹的 DH 系,DBC01、DBC04、DBC05、DBC10、DBC12 为耐抽薹的 DH 系。DBC02 是兼具有黄心、抗根肿病、极耐抽薹三种优异性状的DH系,DBC01是兼具有黄心、抗根肿病、耐抽薹三种优异性状的DH系。
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