利用AFLP标记对南海海域4种笛鲷的遗传多样性分析

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笛鲷属(Lutjanus)鱼类隶属鲈形目(PERCIFORMES)笛鲷科(Lutjanidae),大多为暖水性近底层肉食性鱼类,我国主要产于南海和东海南部,是南海重要的经济鱼类。近年来发现由于过度捕捞等外界因素,笛鲷有个体变小,数量减少的趋势,甚至有些物种尚未采集到。目前,对笛鲷属鱼类分子方面的研究已有很多,但是对AFLP这种分子标记研究的报道还太少,为确定其种质遗传特性,以确保资源的可持续利用,本试验以勒氏笛鲷(L.russellii)、紫红笛鲷(L.argentimaculatus)、红鳍笛鲷(L.erythropterus)、千年笛鲷(L.sebae)为研究对象,从湛江近海进行采样,采用EcoR I/Mse I双酶切组合,对4种笛鲷进行AFLP标记的开发和筛选,并对其进行遗传多样性分析,为揭示笛鲷属鱼类种质资源的情况、制定种质标准等奠定了基础。通过实验,主要研究结果如下: 1.从设计的40对引物中筛选,其中勒氏笛鲷筛选出24对,获得位点1431个,多态位点比例为22.85%;紫红笛鲷筛选引物20对,获得位点1370个,多态位点比例为17.08%;红鳍笛鲷筛选引物22对,获得位点1403个,多态位点比例为17.18%;千年笛鲷筛选引物22对,获得位点1349个,多态位点比例为12.90%。Nei氏遗传距离法计算每种笛鲷30个品种之间平均遗传距离,勒氏笛鲷为0.1035,紫红笛鲷为0.0719;红鳍笛鲷为0.0805;千年笛鲷为0.0572,数据显示勒氏笛鲷种群内30个个体之间平均遗传距离最大,种内分化程度最高,红鳍笛鲷和紫红笛鲷次之,千年笛鲷个体间遗传距离最小。 2.选取两对引物对四种笛鲷群体间遗传多样性进行分析,获得总位点140个,多态位点104个,包括特异性带,勒氏笛鲷1条,紫红笛鲷4条,红鳍笛鲷4条,多态位点占总位点数比例为74.29%。四种笛鲷种群间遗传距离分布在0.3773~0.6650,明显高于各笛鲷种群内遗传距离,其中紫红笛鲷和千年笛鲷的遗传距离最远,为0.6650,勒氏笛鲷和红鳍笛鲷的遗传距离最近,为0.3773。 3.探讨了AFLP银染技术的影响因素,优化了笛鲷属鱼类AFLP反应体系,采用银染检测技术获得了良好的扩增效果,得到的AFLP指纹图谱稳定清晰,结果表明AFLP分子标记适用于笛鲷属种群间和种群内遗传多样性分析。
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