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目的：探讨miR-15b对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4和HL-60细胞分化和增殖的影响及其相关作用机制。
方法：用 1 μM 的 ATRA 分别处理 NB4 和 HL-60 细胞0h,24h,48h,72h 后， qRT-PCR 检测 miR-15b 的表达；将 miR-15b mimics/scramble和anti-15b/anti-con分别转染进NB4和HL-60细胞后，同时在ATRA的处理下，瑞氏-吉姆萨染色后镜下观察细胞的形态学变化，计算分化细胞的比例；流式细胞术检测髓系分化标志CD11b的表达；qRT-PCR检测粒系分化指标CD11b和CSF3R的mRNA表达；CCK-8实验检测细胞的增殖情况；流式细胞术检测细胞的周期变化；运用生物信息学对 miR-15b 的下游靶基因 cyclinE1 作用位点进行预测；western blot检测cyclinE1,Rb,p-Rb的蛋白表达；双荧光素酶报告实验检测miR-15b与cyclinE1的3’UTR端的结合情况；使用siRNA技术敲低cyclinE1后，检测NB4和HL-60细胞增殖和分化的相关指标，western blot检测Rb，p-Rb蛋白表达。
结果：ATRA可以促进miR-15b在NB4和HL-60细胞中的表达且呈时间依赖的方式；与单独使用ATRA处理细胞相比，用ATRA处理已经转染miR-15b mimics的NB4和HL-60细胞，CD11b阳性细胞的比例明显增加，细胞形态向成熟粒系发展且分化细胞数量增多，细胞CD11b和CSF3R的mRNA表达增加；而抑制miR-15b表达则抑制ATRA促分化能力；CCK-8 实验结果显示 miR-15b 可以抑制 NB4 和 HL-60细胞的增殖；细胞流式术检测发现转染miR-15b mimics后阻滞于G0/G1期的细胞数量增多；生物信息学提示cyclinE1是miR-15b的下游靶基因；过表达 miR-15b 可以抑制 cyclinE1 及下游 p-Rb 的表达，抑制miR-15b则促进cyclinE1及下游p-Rb的表达；双荧光素酶报告结果显示miR-15b可以与cyclinE1的3’UTR端直接结合；抑制cyclinE1的蛋白表达可以促进了NB4和HL-60细胞分化，抑制细胞增殖。
结论：MiR-15b可以通过抑制cyclinE1的蛋白表达从而增强ATRA对NB4和HL-60细胞的促分化能力，抑制细胞增殖。
方法：用 1 μM 的 ATRA 分别处理 NB4 和 HL-60 细胞0h,24h,48h,72h 后， qRT-PCR 检测 miR-15b 的表达；将 miR-15b mimics/scramble和anti-15b/anti-con分别转染进NB4和HL-60细胞后，同时在ATRA的处理下，瑞氏-吉姆萨染色后镜下观察细胞的形态学变化，计算分化细胞的比例；流式细胞术检测髓系分化标志CD11b的表达；qRT-PCR检测粒系分化指标CD11b和CSF3R的mRNA表达；CCK-8实验检测细胞的增殖情况；流式细胞术检测细胞的周期变化；运用生物信息学对 miR-15b 的下游靶基因 cyclinE1 作用位点进行预测；western blot检测cyclinE1,Rb,p-Rb的蛋白表达；双荧光素酶报告实验检测miR-15b与cyclinE1的3’UTR端的结合情况；使用siRNA技术敲低cyclinE1后，检测NB4和HL-60细胞增殖和分化的相关指标，western blot检测Rb，p-Rb蛋白表达。
结果：ATRA可以促进miR-15b在NB4和HL-60细胞中的表达且呈时间依赖的方式；与单独使用ATRA处理细胞相比，用ATRA处理已经转染miR-15b mimics的NB4和HL-60细胞，CD11b阳性细胞的比例明显增加，细胞形态向成熟粒系发展且分化细胞数量增多，细胞CD11b和CSF3R的mRNA表达增加；而抑制miR-15b表达则抑制ATRA促分化能力；CCK-8 实验结果显示 miR-15b 可以抑制 NB4 和 HL-60细胞的增殖；细胞流式术检测发现转染miR-15b mimics后阻滞于G0/G1期的细胞数量增多；生物信息学提示cyclinE1是miR-15b的下游靶基因；过表达 miR-15b 可以抑制 cyclinE1 及下游 p-Rb 的表达，抑制miR-15b则促进cyclinE1及下游p-Rb的表达；双荧光素酶报告结果显示miR-15b可以与cyclinE1的3’UTR端直接结合；抑制cyclinE1的蛋白表达可以促进了NB4和HL-60细胞分化，抑制细胞增殖。
结论：MiR-15b可以通过抑制cyclinE1的蛋白表达从而增强ATRA对NB4和HL-60细胞的促分化能力，抑制细胞增殖。