表皮生长因子受体抑制剂与化疗联合应用对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

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目的:探讨表皮生长因子受体抑制剂Erlotinib(TarcevaTM,OSI-774)单药应用或与化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-Fu)、紫杉醇(Paclitaxel,PTX)两联应用对人胃腺癌细胞株SNU-1增殖和凋亡的影响。方法:表皮生长因子受体抑制剂Erlotinib单药或与5-Fu、PTX两联作用于人胃癌细胞株SNU-1后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖抑制情况,计算联合指数(Combination index,CI)用以分析联合用药时各药物之间的相互作用。用膜联蛋白-V(Annexin-V)和碘化丙啶(PI)双染色及流式细胞仪检测细胞凋亡,Western印迹法检测早期凋亡蛋白多腺苷二磷酸核糖聚合酶[Poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]。结果:Erlotinib单独应用或与5-Fu、PTX联合应用对SNU-1细胞株的生长抑制作用随着剂量的增加以及作用时间的延长而增强。Erlotinib+PTX的联合指数<Erlotinib+5-Fu的联合指数<0.8,提示Erlotinib与5-Fu、PTX协同抑制SNU-1细胞生长,Erlotinib+PTX的协同作用强于Erlotinib+5-Fu。流式细胞仪检测显示Erlotinib (50μmol/L)、5-Fu(15μmol/L)和PTX(0.5μmol/L)作用72h后细胞凋亡率分别为23.2%±3.1%、39.7%±3.5%和56.6%±4.1%,显著高于对照组的7.6%±1.2%(P<0.05),联合用药组的细胞凋亡率Erlotinib+5-Fu为49.1%±2.7%、Erlotinib+PTX为62.7%±4.3%,显著高于单一用药组(P<0.05)。Erlotinib单一用药或与5-Fu、PTX联合用药后与对照组相比89kD的PARP裂解片段增加。结论:Erlotinib具有抑制SNU-1胃癌细胞增殖的作用。Erlotinib单独应用或与5-Fu、PTX联合应用时的抗胃癌作用呈剂量依赖性和时间依赖性。SNU-1细胞对三种药物的敏感性顺序为PTX>5-Fu>Erlotinib。Erlotinib通过活化Caspase-3,降解多腺苷二磷酸核糖聚合酶,使其丧失DNA修复功能,促进细胞凋亡。Erlotinib与5-Fu、PTX具有协同抗胃癌作用,Erlotinib+PTX的协同作用强于Erlotinib+5-Fu。
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