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分子印迹技术(Molecular imprinted technology,MIT)是一种可获得对模板分子具有特异性识别的高分子聚合物的制备技术。近年来,分子印迹作为一种新型、具有高效选择性的吸附分离技术发展迅速,在小分子领域的研究已经趋于成熟。在蛋白质分离分析方面,分子印迹聚合材料与模板蛋白质的特异性结合既类似于天然“抗原-抗体”的结合特征,又有着天然抗体所不具备的优势,但是相比于在小分子方面的快速发展,蛋白质分子印迹方向却由于蛋白质的构象复杂、结构灵活、体积庞大等原因成为了既有意义又具有挑战的研究领域。低共熔溶剂(Deep eutectic solvents,DES)是一种新型的绿色溶剂,通常由一定化学计量比的氢键受体和氢键给体组合而成,其凝固点明显低于各个组分纯物质的熔点。低共熔溶剂因为有着低毒、制备简单、可降解、可设计合成等优点,已在许多领域得到应用,但是,低共熔溶剂在分子印迹领域的研究还不成熟,因此对低共熔溶剂进行分子印迹方向的应用研究具有重要意义。本研究结合低共熔溶剂与分子印迹聚合技术以及磁性材料,合成了三种新型的可对蛋白质进行选择性分离分析的磁性表面分子印迹聚合物并对其吸附性能进行了研究。主要内容如下:(1)基于甲基丙烯酸-氯化胆碱低共熔溶剂为单体的磁性印迹聚合物的制备及对蛋白质的识别和分离研究以丙烯酸修饰的四氧化三铁为载体(Fe3O4@AA),牛血红蛋白(BHb)为模板分子,甲基丙烯酸-氯化胆碱低共熔溶剂(DES)为单体,合成了一种新型的磁性低共熔溶剂分子印迹聚合物(magnetic DES-MIPs),该分子印迹聚合物可以实现对牛血红蛋白的特异性识别和选择性分离。对合成的印迹聚合物进行了红外(FT-IR)、热重(TGA)、扫描电镜(SEM)、透射电镜(TEM)、动态光散射(DLS)和磁力曲线(VSM)的表征以及元素组成的分析,结果表明所需印迹聚合物成功被合成且具有良好的磁性。吸附实验结果显示,相比于非印迹聚合物,所合成的印迹聚合物粒子有着良好的动力学性能,4h之内就可达到吸附平衡,平衡吸附浓度为1.0 mg/mL,理论最大吸附量达到了 175.44 mg/g,印迹因子达到4.57。该印迹聚合物在竞争吸附实验和实际样品吸附实验中表现出了良好的特异吸附和选择吸附能力,表明该印迹聚合物粒子可以将牛血红蛋白从双组份混合样品和实际样品中分离出来。(2)基于双键低共熔溶剂修饰的磁性纳米颗粒为载体的印迹聚合物的制备及对溶菌酶的识别和分离研究以溶菌酶(Lys)作为模板蛋白,四氧化三铁纳米粒子为载体(Fe3O4),衣康酸-氯化胆碱低共熔溶剂(DES)作为双键修饰剂,丙烯酸(AA)为功能单体,合成了可用于分离溶菌酶的表面分子印迹聚合物(MIP-Fe304@DES@AA)。对产物进行了红外(FT-IR)、热重(TGA)、透射电镜(TEM)和磁力曲线(VSM)的表征,并且对印迹聚合物的动力学、热力学、选择吸附能力和实际应用能力进行了研究。实验对合成配方进行了优化,最终确定溶菌酶和丙烯酸的最优加入量分别为25 mg和120 μL。印迹聚合物在溶菌酶平衡吸附浓度1.0 mg/mL下可以在前2 h之内快速吸附,8 h之内达到饱和吸附容量,印迹因子为4.48。所合成聚合物热力学吸附曲线符合Langmuir模型,理论最大吸附容量为106.38 mg/g。单一选择实验和竞争吸附实验的分析都证明所合成的印迹聚合物对溶菌酶有着很好的特异吸附能力。重复利用实验结果表明印迹聚合物在重复使用5次后依然有着比较稳定的吸附量,重复性良好。(3)基于衣康酸-氯化胆碱低共熔溶剂为单体的磁性印迹聚合物的制备及对牛血红蛋白的识别和分离研究以衣康酸-氯化胆碱低共熔溶剂(DES)作为单一功能单体,四氧化三铁为载体(Fe304),牛血红蛋白(BHb)为模板,合成了可以选择吸附牛血红蛋白的印迹聚合物(MIP-Fe304@DES)。该制备方法简化了四氧化三铁改性步骤,直接利用低共熔溶剂在粒子表面合成了印迹聚合物,红外(FT-IR)、热重(TGA)、透射电镜(TEM)以及磁力曲线(VSM)的分析都证明实验最终确实合成了“壳核”聚合物。热力学吸附实验和动力学吸附实验表明,印迹聚合物可以在牛血红蛋白平衡吸附浓度1.2mg/mL下5 h达到最大吸附,印迹因子为2.89,且其吸附等温线符合Langmuir模型,可得理论最大吸附量196.08 mg/g。选择吸附实验和竞争吸附实验都表明印迹聚合物可以在单一环境下和双组份溶液环境下将牛血红蛋白分离出来,有着很好的特异识别模板蛋白的性能,实际样品分析结果表明该印迹聚合物可以应用于复杂样品的分离分析。重复利用实验表明印迹聚合物可以使用4次以上。